本文關(guān)鍵詞：缺氧環(huán)境下基因CRY1表達(dá)與大鼠肝細(xì)胞BRL-3A凋亡的關(guān)系

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【摘要】：目的觀察模擬缺氧條件下大鼠BRL-3A細(xì)胞中基因CRY1與細(xì)胞凋亡及NF-Kappa B凋亡信號(hào)通路的關(guān)系。方法通過氯化鈷體外模擬缺氧環(huán)境,觀察大鼠肝BRL-3A細(xì)胞CRY1蛋白表達(dá);篩選、構(gòu)建CRY1mRNA慢病毒干擾載體,對(duì)BRL-3A細(xì)胞CRY1mRNA表達(dá)進(jìn)行敲減,利用Western Blot法對(duì)BRL-3A細(xì)胞中CRY1干擾效能進(jìn)行觀察,并觀察缺氧條件下轉(zhuǎn)錄因子CRY1敲減后BRL-3A細(xì)胞凋亡、NF-Kappa B、Caspase3蛋白表達(dá)。結(jié)果梯度濃度氯化鈷模擬缺氧條件下BRL-3A細(xì)胞中CRY1表達(dá)隨氯化鈷濃度增加,表達(dá)逐漸下調(diào);成功構(gòu)建CRY1mRNA干擾載體pLenti6.3-EGFP-rCRY1-miR,有效敲減BRL-3A細(xì)胞中CRY1mRNA和蛋白表達(dá),在100μM氯化鈷模擬缺氧條件下YY1敲減后NF-Kappa B、Caspase3蛋白表達(dá)增加,凋亡持續(xù)增加。結(jié)論缺氧致大鼠BRL-3A細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄因子CRY1表達(dá)下調(diào),并通過NF-KB凋亡信號(hào)通過激活誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
【作者單位】： 浙江省湖州市婦幼保健院;上海第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長征醫(yī)院;上海市江灣醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 缺氧 CRY 肝細(xì)胞 RNA干擾 凋亡
【基金】：上海市衛(wèi)生局科研計(jì)劃項(xiàng)目(2010055)
【分類號(hào)】：R575
【正文快照】： 鑒于目前重癥創(chuàng)傷失血性休克治療中靶向治療的貧乏[1],筆者期望在重癥失血性休克的救治中有新的、確切的靶點(diǎn)。通過前期研究筆者發(fā)現(xiàn):基因CRY1在經(jīng)受重度創(chuàng)傷失血性休克而存活的大鼠肝臟中和死亡大鼠肝臟中出現(xiàn)差異表達(dá)[2]。通過文獻(xiàn)復(fù)習(xí)發(fā)現(xiàn),CRY1為時(shí)鐘相關(guān)基因,在排除前期數(shù)

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