本文關(guān)鍵詞：外源性S100A6蛋白對(duì)人結(jié)直腸癌細(xì)胞S100A6基因轉(zhuǎn)錄的影響及機(jī)制探討

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【摘要】：目的:探討鈣周期蛋白S100A6對(duì)人結(jié)直腸癌細(xì)胞系HCT116及SW480中S100A6基因轉(zhuǎn)錄的影響及機(jī)制。方法:首先采用原核表達(dá)方法制備重組人S100A6蛋白(recombinant human S100A6,rh S100A6)并鑒定;rh S100A6蛋白(終濃度為10μg/ml)、重組腺病毒Adsiβ-catenin(可表達(dá)β-catenin的siRNA)處理結(jié)直腸癌細(xì)胞HCT116、SW480及正常腸上皮細(xì)胞FHC,采用半定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription and polymerase chain reaction,RT-PCR)及定量實(shí)時(shí)聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real time polymerase chain reaction,q PCR)檢測(cè)S100A6 mRNA的水平,采用RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞中E-cadherin mRNA水平,采用Western blot檢測(cè)并比較HCT116及SW480細(xì)胞核中β-catenin蛋白的水平變化,采用細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)細(xì)胞中β-catenin分布的變化。結(jié)果:成功制備rh S100A6蛋白;外源性rh S100A6蛋白上調(diào)HCT116及SW480細(xì)胞中S100A6 mRNA水平和細(xì)胞核中的β-catenin蛋白水平并促進(jìn)β-catenin發(fā)生核移位,同時(shí)下調(diào)細(xì)胞中E-cadherin mRNA水平;Adsiβ-catenin與rh S100A6聯(lián)合處理組的S100A6 mRNA水平明顯低于單獨(dú)rh S100A6處理組。所有差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:胞外的S100A6蛋白增強(qiáng)結(jié)直腸癌細(xì)胞中S100A6基因的轉(zhuǎn)錄,其機(jī)制可能涉及β-catenin通路的激活。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 結(jié)直腸癌 SA β-catenin
【分類號(hào)】：R735.34
【正文快照】： 結(jié)直腸癌是一種常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤,其發(fā)病率和死亡率分別位居全世界第三位和第四位,在我國(guó)也均呈逐年上升趨勢(shì),形勢(shì)十分嚴(yán)峻[1]。當(dāng)前,早期結(jié)直腸癌患者的治療以外科手術(shù)切除為主,中晚期輔以放療和化療的綜合治療為主,但晚期患者5年生存率還是比較低。進(jìn)一步研究結(jié)直腸癌發(fā)

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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6 張繼民,劉明姬,n澗托，

本文編號(hào)：865486