本文關鍵詞：維生素D水平及受體基因多態(tài)性與結(jié)核病發(fā)病關系的研究

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【摘要】：目的:通過檢測結(jié)核病患者血漿維生素D水平,比較患者維生素D水平與健康受試者的差異,分析維生素D缺乏與結(jié)核病發(fā)病及病情嚴重程度之間的相關性;通過對患者維生素D受體基因多態(tài)性的檢測,探討不同受體基因型與結(jié)核病發(fā)病及病情嚴重程度之間的關系。聯(lián)合分析人體維生素D水平、維生素D受體基因多態(tài)性與結(jié)核病三者之間的關系,為進一步開展大規(guī)模維生素D缺乏及維生素D受體基因多態(tài)性與結(jié)核病之間關系的研究提供依據(jù),也為結(jié)核病高危人群進一步的確定以及維生素D用于結(jié)核病的預防和治療提供參考。方法:建立UPLC-MS/MS測定人血漿維生素D的方法并測定健康受試者及結(jié)核病患者血漿中25(OH)D2與25(OH)D3的濃度,求和得出25(OH)D的血漿濃度。以血漿中25(OH)D濃度為12ng/ml和20ng/ml分別作為維生素D缺乏、不足和充足的分界點標準,將入組受試者按維生素D水平分為三組,了解不同組受試者的維生素D水平及維生素D狀態(tài)的分布差異,分析維生素D水平與結(jié)核病易感性之間的關系。建立聚合酶鏈反應及限制性片段長度多態(tài)性分析(PCR-RFLP)方法并測定入組受試者維生素D受體在Fok I、Bsm I、Apa I和Taq I四個位點的基因多態(tài)性,按照不同的基因型分組,對比入組受試者維生素D受體基因型分布的差異,分析維生素D受體基因多態(tài)性與結(jié)核病易感性之間的關系。收集入組受試者的一般資料以及患者的相關臨床和實驗室檢查資料,包括發(fā)病現(xiàn)狀(是否耐藥、是否復治)、嚴重程度(病灶范圍、空洞形成)及常見伴發(fā)病(肺外結(jié)核、糖尿病)等,再將入組患者按照上述不同的臨床特征分組,對比不同組患者的維生素D水平及維生素D受體基因型分布,聯(lián)合分析人體內(nèi)維生素D水平及維生素D受體多態(tài)性與結(jié)核病發(fā)病及病情嚴重程度之間的相關性。結(jié)果:本研究所建立的UPLC-MS/MS法在25羥基維生素D2(r=0.9980)和25羥基維生素D3(r=0.9999)于2~80ng/ml濃度范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關系,日內(nèi)、日間的準確度(RE)和精密度(RSD)均小于10%,定量下限和檢測下限分別為2ng/ml和0.5ng/ml,適用于人血漿中25(OH)D的定量分析。入組結(jié)核病患者180例及健康志愿者59例,結(jié)核病患者再根據(jù)藥敏結(jié)果分為藥物敏感組128例和耐藥結(jié)核組52例。在全部受試者中,與健康志愿者(C=21.97 ng/ml)相比,藥物敏感組患者(C=10.42 ng/ml)和耐藥結(jié)核組患者(C=11.11 ng/ml)的25(OH)D平均濃度明顯更低(P0.001);在結(jié)核病患者中,與表現(xiàn)雙肺病變的患者相比,病灶局限在單側(cè)的患者維生素D水平相對更高(P=0.030);在耐藥患者中,與合并肺外結(jié)核的患者相比,不合并肺外結(jié)核的患者維生素D水平相對更高(P=0.001)。研究各位點基因多態(tài)性,與健康對照組相比,Ff基因型(P=0.001)、ff基因型(P0.001)及f等位基因(P0.001)在藥物敏感組患者中出現(xiàn)的頻率更高,ff基因型(P0.001)和f等位基因(P0.001)在耐藥結(jié)核組患者中出現(xiàn)的頻率同樣更高。此外,在結(jié)核病患者中Ff基因型(OR 0.16,95%CI 0.06-0.45)、ff基因型(OR 0.35,95%CI 0.13-0.93)和Bb基因型(OR 0.13,95%CI 0.02-0.99)患者合并肺外結(jié)核的比例更低;在男性患者中ff基因型患者復治比例(P=0.025)和發(fā)生空洞的比例(P=0.001)相對更高;在非耐藥患者中,AA基因型患者出現(xiàn)空洞的比例相對更高(P=0.008);未發(fā)現(xiàn)Taq I位點VDR基因多態(tài)性與各臨床特征之間存在任何相關性。分析維生素D水平與維生素D受體基因多態(tài)性的關系,結(jié)果顯示bb基因型患者的維生素D水平顯著高于Bb基因型的患者(P0.05);并未發(fā)現(xiàn)其他位點各組基因型對三組人群的維生素D水平有影響。結(jié)論:維生素D水平、維生素D受體基因多態(tài)性與結(jié)核病的發(fā)病及病情嚴重程度之間存在著一定的相關性。維生素D缺乏的人群可能更容易罹患結(jié)核病,維生素D缺乏的患者病情可能更加嚴重,更容易侵及雙肺、合并肺外結(jié)核。Fok I位點的基因多態(tài)性可能與結(jié)核病患病有關,表現(xiàn)為ff基因型的人群可能更容易感染結(jié)核病。
【關鍵詞】：維生素D水平 維生素D受體基因多態(tài)性 結(jié)核病
【學位授予單位】：北京市結(jié)核病胸部腫瘤研究所
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R52
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 縮略詞對照表10-11
• 前言11-14
• 第一部分 UPLC-MS/MS法測定人血漿中25羥基維生素D的濃度及其應用14-28
• 前言16
• 1 材料16-17
• 2 方法與結(jié)果17-26
• 3 討論26-28
• 第二部分 維生素D水平及維生素D受體基因多態(tài)性與結(jié)核病發(fā)病的關系研究28-52
• 前言32
• 1 材料32-34
• 2 樣品檢測34-36
• 3 數(shù)據(jù)處理36-38
• 4 結(jié)果38-47
• 5 討論47-52
• 綜述 維生素D與結(jié)核病相關性的研究進展52-62
• 參考文獻62-74
• 附錄1 碩士期間發(fā)表論文74-75
• 附錄2 致謝75-76
• 附錄3 個人簡歷76

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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本文編號：852728