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紫花苜蓿MsNAP基因克隆及煙草轉(zhuǎn)化

發(fā)布時(shí)間:2017-09-12 07:44

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【摘要】:NAP轉(zhuǎn)錄因子是植物體內(nèi)特有的轉(zhuǎn)錄因子,在調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育、衰老速度以及響應(yīng)生物、非生物脅迫等方面有重要作用。采用RT-PCR方法克隆紫花苜蓿NAP轉(zhuǎn)錄因子基因,將其命名為MsNAP(GenBank登錄號(hào):KM211498.1),MsNAP編碼區(qū)長(zhǎng)822bp,編碼274個(gè)氨基酸。生物信息學(xué)分析顯示:其與其他物種NAP蛋白具有較高的同源性,與蒺藜苜蓿同源性最高。熒光定量技術(shù)分析結(jié)果顯示:MsNAP基因在花中表達(dá)量最高,衰老葉片中的表達(dá)水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于未衰老葉片。利用DNA重組技術(shù)將MsNAP基因完整編碼區(qū)連接至植物表達(dá)載體pBI121,成功構(gòu)建植物表達(dá)載體pBI-MsNAP,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)方法轉(zhuǎn)化煙草,PCR和RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示,成功獲得了轉(zhuǎn)MsNAP基因的轉(zhuǎn)基因煙草,初步證明在轉(zhuǎn)基因煙草中外源基因MsNAP能夠轉(zhuǎn)錄表達(dá),為研究MsNAP基因功能奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 北京林業(yè)大學(xué)林學(xué)院草坪研究所;
【關(guān)鍵詞】紫花苜蓿 MsNAP基因 煙草 轉(zhuǎn)基因
【基金】:奧林高爾夫教育與研究基金項(xiàng)目“高爾夫球場(chǎng)草坪銹病的病原鑒定及微生物防治”(AL2015003) 中國林學(xué)會(huì)-青年人才托舉工程項(xiàng)目資助
【分類號(hào)】:S541.9;Q943.2
【正文快照】: 作者簡(jiǎn)介:晁躍輝(1984-),男,山東肥城人,講師,博士,2014年畢業(yè)于中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院,研究方向?yàn)椴莸刂参锓肿由飳W(xué),E-mail:chaoyuehui@163.com.轉(zhuǎn)錄因子是一組具有識(shí)別特異DNA序列的蛋白,能促進(jìn)或抑制某些特定基因的轉(zhuǎn)錄及表達(dá),從而導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的改變。在植物葉片發(fā)育和衰,

本文編號(hào):835973

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