本文關(guān)鍵詞：中華絨螯蟹MIH基因的原核表達及其外源重組蛋白對內(nèi)源性基因表達的影響

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【摘要】：蛻皮抑制激素(molt inhibiting hormone,MIH)對甲殼動物的蛻殼生長起著至關(guān)重要的調(diào)控作用。本研究通過優(yōu)化MIH基因的原核表達條件,獲得其外源重組蛋白,研究了外源重組蛋白注射到中華絨螯蟹(Eriocheir sienesis)體內(nèi)后,對眼柄中內(nèi)源性MIH基因表達的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),構(gòu)建的重組表達質(zhì)粒(p ET-28a-MIH)在27℃條件下用1.0 mmol/L的異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropy-β-Dthiogalactopyranoside,IPTG)誘導6 h,目的蛋白表達量最高,此為該基因的原核表達優(yōu)化條件。進而將MIH重組蛋白注射到活體中華絨螯蟹,發(fā)現(xiàn)注射4 h后在眼柄中的內(nèi)源MIH表達水平顯著高于8、24 h和空白對照組,表明外源性MIH重組蛋白只能在短時期內(nèi)對內(nèi)源性MIH表達有促進作用,從而會在一定程度上抑制中華絨螯蟹的蛻殼。研究結(jié)果為中華絨螯蟹的蛻殼機制研究和后續(xù)的抗體制備提供了基礎(chǔ)資料。
【作者單位】： 上海海洋大學農(nóng)業(yè)部淡水水產(chǎn)種質(zhì)資源重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 中華絨螯蟹 蛻皮抑制激素(MIH) 原核表達 條件優(yōu)化 基因表達
【基金】：上海市中華絨螯蟹產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項目(滬農(nóng)科(產(chǎn))字2015-4號) 上海市科委崇明科技專項項目(No.13391912102) 上海市工程技術(shù)中心建設項目(No.03DZ2251800)
【分類號】：S917.4
【正文快照】： 蛻皮抑制激素(molt inhibiting hormone,MIH)是由位于甲殼動物眼柄中的X器——竇腺復合體(X-organ sinus gland,XO-SG)所分泌的一種激素,主要通過抑制Y-器官合成及分泌蛻皮激素來達到抑制蛻殼的作用(Hopkins,2009;Nakatsuji et al.,2006;Stewart et al.,2013)。有研究報道,MIH

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