本文關鍵詞：大腸桿菌CFT073中Curli系統(tǒng)重要基因csgF的克隆、表達、純化和結構分析

  更多相關文章： 大腸桿菌CFT CsgF 基因克隆 蛋白質表達純化 凝膠排阻層析色譜

【摘要】：【目的】對大腸桿菌CFT073中Culri系統(tǒng)的重要蛋白CsgF進行高效表達,探索其純化條件和三維結構,為研究Curli生物合成機制提供理論基礎�！痉椒ā恳源竽c桿菌CFT073基因組為模板擴增csgF基因,構建pET28a-csg F(nsp)-N-6His、pET28a-csg F(20-129)-N-6His、pET28a-csg F-C-6His和p ET28a-csg F(nsp)-C-6His等重組質粒,轉化到大腸桿菌DH5α并在BL21(DE3)中誘導表達;通過十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定CsgF蛋白在大腸桿菌中的表達情況,用Ni-NTA His Bind Resin和凝膠排阻層析色譜純化重組蛋白CsgF,SDS-PAGE和Western blotting方法鑒定分析;用Pull down實驗研究CsgF與CsgG蛋白的相互作用,同源模建方法分析重組蛋白CsgF的三級結構�！窘Y果】克隆了目的基因csg F,并篩選出穩(wěn)定CsgF蛋白的條件:50 mmol/L Sodium acetate(pH 5.0)、150 mmol/L NaCl、5%Glyercol;CsgF與CsgG存在相互作用,CsgF三維結構模型顯示為(β/α)�！窘Y論】獲得了高純度穩(wěn)定的CsgF重組蛋白及其三維結構,為進一步研究CsgF結構與功能奠定了基礎。
【作者單位】： 中南林業(yè)科技大學經(jīng)濟林育種與栽培國家林業(yè)局重點實驗室;中南林業(yè)科技大學湖南省經(jīng)濟林培育與利用協(xié)同創(chuàng)新中心;中國科學院生物物理研究所;
【關鍵詞】： 大腸桿菌CFT CsgF 基因克隆 蛋白質表達純化 凝膠排阻層析色譜
【基金】：國家自然科學基金項目(No.31570682)~~
【分類號】：Q78
【正文快照】： 淀粉樣蛋白纖維(Amyloids)是一類錯誤折疊引發(fā)疾病的蛋白聚集體。近年來人們在細菌、真菌、蛛形綱動物、魚和哺乳動物中發(fā)現(xiàn)了功能淀粉樣蛋白纖維[1-6]。Curli是一種典型的功能淀粉樣纖維,它是大腸桿菌(Escherichia coli)和沙門氏菌(Salmonella spp.)中表達產(chǎn)生的一類附著在細

【相似文獻】

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 胡鋼清;朱懷球;;致病性大腸桿菌CFT073菌株基因組的再注釋[A];中國生物醫(yī)學工程進展——2007中國生物醫(yī)學工程聯(lián)合學術年會論文集（下冊）[C];2007年

，

本文編號：801069