本文關(guān)鍵詞：慢病毒介導(dǎo)沉默食管癌細(xì)胞53BP1基因表達(dá)對裸鼠移植瘤放射敏感性的研究

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【摘要】：背景與目的:p53結(jié)合蛋白1(p53 binding protein,53BP1)在多種正常組織和腫瘤細(xì)胞中有表達(dá),與放射線照射后細(xì)胞周期阻滯有關(guān)。體外實驗證實抑制53BP1的蛋白表達(dá)可有效地消除腫瘤細(xì)胞照射后引起的周期阻滯,增加放射敏感性。但體內(nèi)實驗國內(nèi)尚未見相關(guān)報道。該研究旨在探討沉默食管癌細(xì)胞53BP1基因?qū)β闶笠浦擦龇派涿舾行缘挠绊�。方�?將48只BALB/c/nu裸鼠按隨機數(shù)字表法分為對照組、單純照射組、空載體組、空載體加照射組、沉默53BP1組以及沉默53BP1加照射組,每組8只,于裸鼠皮下接種相應(yīng)食管癌細(xì)胞ECA109,制備裸鼠模型,給予15 Gy放射線單次照射,受照后1 h每組處死3只裸鼠,將腫瘤標(biāo)本按蛋白[質(zhì)]印跡法(Western blot)及流式細(xì)胞分析要求處理,Western blot檢測移植瘤組織中CHK1、CHK2和磷酸化CHK2-T68的表達(dá),流式細(xì)胞術(shù)分析裸鼠腫瘤組織中細(xì)胞周期分布和細(xì)胞凋亡。觀察各組剩余裸鼠移植瘤照射后的生長情況,移植瘤體積變化情況。結(jié)果:所有接種裸鼠均成活并有腫瘤形成,各組之間腫瘤體積大小差異無統(tǒng)計學(xué)意義(F=0.67,P=0.69);單純照射組和空載體照射組裸鼠的腫瘤生長速度慢于未照射組(P=0.02),沉默53BP1加照射組裸鼠的腫瘤生長速度最慢(P=0.03),沉默53BP1加照射組的相對生長速率較空載體加照射組和單純照射組降低,生長抑制率增加(P=0.01)。沉默53BP1加照射組的q值為1.45;沉默53BP1加照射組裸鼠體內(nèi)CHK1和CHK2的蛋白表達(dá)產(chǎn)物未見明顯變化(P=0.71),CHK2-T68的磷酸化水平較單純照射組和空載體照射組明顯下降(P=0.03),各組裸鼠的瘤組織中細(xì)胞周期分布和凋亡率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.45)。結(jié)論:體內(nèi)研究顯示沉默53BP1基因可以提高食管癌放射敏感性。
【作者單位】： 河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院放療三病區(qū);河北醫(yī)科大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 食管癌 BP 移植瘤 放射敏感性 RNA干擾
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(30470524);國家自然科學(xué)基金資助項目(30870743);國家自然科學(xué)基金資助項目(8157111792) 河北省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點課題計劃項目(20100416)
【分類號】：R735.1
【正文快照】： 照射后細(xì)胞周期阻滯為受損細(xì)胞修復(fù)創(chuàng)造了條件,消除照射后G2期阻滯,促使照射后G2期未修復(fù)的細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂期,可以增加放射敏感性[1]。我們前期研究采用RNA干擾技術(shù)抑制食管癌細(xì)胞ECA109中細(xì)胞周期檢測點激酶p53結(jié)合蛋白1(p53 binding protein 1,53BP1)的表達(dá)后,發(fā)現(xiàn)CHK2-p

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本文編號：800055