本文關(guān)鍵詞：過表達羧化途徑及失活蘋果酸酶基因?qū)Υ竽c桿菌好氧發(fā)酵產(chǎn)蘋果酸的影響

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【摘要】：蘋果酸是一種重要的C4二羧酸,在食品、醫(yī)藥、化工等領(lǐng)域有廣泛的應用。本文主要研究羧化途徑強化及蘋果酸酶失活對大腸桿菌好氧發(fā)酵生產(chǎn)蘋果酸的影響。首先在大腸桿菌E2中過表達了磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因ppc,得到菌株E21,蘋果酸積累量從0.57 g/L提高到3.83 g/L。隨后,分別過表達來自谷氨酸棒桿菌的丙酮酸羧化酶基因pyc和來自琥珀酸放線桿菌的磷酸烯醇式丙酮酸激酶pck基因,相應的工程菌株E21(pTrcpyc)和E21(pTrc-A-pck)分別產(chǎn)6.04和5.01 g/L蘋果酸,得率分別達到0.79和0.65 mol/mol葡萄糖。敲除E21中的蘋果酸酶基因mae A和mae B,蘋果酸產(chǎn)量也顯著提高了36%,達到5.21 g/L,得率為0.62 mol/mol。然而,在過表達pyc的基礎上敲除蘋果酸酶基因并不能進一步提高蘋果酸的產(chǎn)量。經(jīng)過搖瓶發(fā)酵條件的初步優(yōu)化,菌株E21(pTrcpyc)生產(chǎn)12.45 g/L蘋果酸,得率為0.84 mol/mol,達到理論得率的63.2%。
【作者單位】： 天津大學化工學院教育部系統(tǒng)生物工程重點實驗室;天津化學化工協(xié)同創(chuàng)新中心;
【關(guān)鍵詞】： 大腸桿菌 代謝工程 蘋果酸 蘋果酸酶 羧化途徑
【基金】：國家自然科學基金(No.NSFC-21390201) 國家重點基礎研究發(fā)展計劃(973計劃)(No.2012CB725203)資助~~
【分類號】：TQ921
【正文快照】： Received:March 13,2016;Accepted:April 18,2016Supported by:National Natural Science Foundation of China(No.NSFC-21390201),National Basic Research Program of China(973Program)(No.2012CB725203).Corresponding author:Tao Chen.Tel:+86-22-27406770;E-mail:chenta

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1 孟鑫;尚宏麗;鄭益;;過量表達蘋果酸酶對E.coli脂肪酸合成能力的影響[J];食品工業(yè)科技;2013年12期

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本文編號：790530