本文關(guān)鍵詞：橘小實蠅nAChR α9亞基基因的鑒定及其時空表達

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【摘要】：【目的】橘小實蠅Bactrocera dorsalis是世界性分布的危害果蔬的重要檢疫性農(nóng)業(yè)害蟲,目前已對包括新煙堿類在內(nèi)的多種殺蟲劑產(chǎn)生了抗性。本研究在克隆鑒定橘小實蠅煙堿型乙酰膽堿受體(n AChR)α9亞基基因c DNA的基礎上,對其分子特性和系統(tǒng)發(fā)育進行生物信息學分析,并檢測了該基因在橘小實蠅不同發(fā)育階段及成蟲不同組織中的表達模式,為進一步研究其潛在功能及在抗藥性中的作用奠定基礎�！痉椒ā客ㄟ^高通量測序技術(shù)對橘小實蠅進行轉(zhuǎn)錄組測序,對高質(zhì)量序列拼接組裝、基因鑒定及同源性比對分析,預測橘小實蠅煙堿型乙酰膽堿受體候選基因。采用RTPCR和RACE(rapid-amplification of c DNA ends)技術(shù)克隆該基因的c DNA全長序列,利用生物信息學分析軟件分析其基本生物信息;以α-tubulin為內(nèi)參基因,利用q PCR研究該基因mRNA在橘小實蠅不同發(fā)育階段及成蟲頭、胸、腹等組織中的表達模式�！窘Y(jié)果】根據(jù)預測的基因序列,設計特異性引物進行RACE擴增,從橘小實蠅中克隆獲得一條煙堿型乙酰膽堿受體基因的全長序列,c DNA全長1 486 bp,完整開放閱讀框1 281 bp,編碼426個氨基酸,推測其蛋白質(zhì)分子量為49.1 k D,理論等電點6.56。該基因經(jīng)序列比對命名為Bdα9,Gen Bank登錄號為JQ178254。氨基酸同源性及系統(tǒng)進化樹分析顯示,該基因的編碼蛋白具有n AChRα亞基的典型特征,并與Agα9和Dmβ3聚類在一起,與其他昆蟲n AChRα9亞基具有22%~27%的氨基酸序列一致性。q PCR結(jié)果表明,Bdα9mRNA在橘小實蠅整個發(fā)育階段均有表達,成蟲期的表達量顯著高于卵、2齡幼蟲、3齡幼蟲和蛹期;Bdα9在橘小實蠅成蟲頭部中表達量最高,且顯著高于胸部和腹部中的表達量�！窘Y(jié)論】鑒定了橘小實蠅煙堿型乙酰膽堿受體基因Bdα9,明確了該基因在橘小實蠅不同發(fā)育階段及成蟲不同組織中的表達模式。根據(jù)q PCR的結(jié)果,推測Bdα9可能在橘小實蠅成蟲期具有重要功能。
【作者單位】： 西南大學植物保護學院昆蟲學及害蟲控制工程重慶市市級重點實驗室;貴陽學院生物與環(huán)境工程學院;
【關(guān)鍵詞】： 橘小實蠅 煙堿型乙酰膽堿受體 基因克隆 序列分析 表達譜 實時定量PCR
【基金】：中國博士后基金(2013M540693) 重慶市前沿與基礎研究項目(cstc2013jcyj A80020) 重慶市博士后特別資助項目(Xm2014114) 公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(201203038)
【分類號】：S433
【正文快照】： 橘小實蠅Bactrocera dorsalis是一種世界性分布的危害果蔬的實蠅科(Tephritidae)重要農(nóng)業(yè)害蟲,已被多個國家列為檢疫對象。橘小實蠅可危害46科250多種水果和蔬菜。成蟲可刺穿果皮產(chǎn)卵,卵在果肉中孵化主要通過幼蟲取食為害,大大降低了果品的市場價值,給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)帶來巨大的經(jīng)濟

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 付佑勝;趙桂東;潘建平;田世堯;王沫;;橘小實蠅引誘物質(zhì)研究進展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學;2006年09期

2 崔俊霞;徐瑛;聞偉剛;陳先鋒;張同心;;橘小實蠅快速檢疫鑒定方法[J];昆蟲知識;2006年05期

3 周國梁;印麗萍;李尉民;張衛(wèi)東;;利用概率模型定量評估橘小實蠅傳入我國的可能性[J];植物檢疫;2006年S1期

4 周國梁;葉軍;袁平;潘士華;;橘小實蠅在上海局部暴發(fā)成因分析[J];植物檢疫;2006年S1期

5 杜迎剛;陳家驊;季清娥;何官榕;黃居昌;;橘小實蠅對蛋白和糖的反應[J];福建農(nóng)林大學學報(自然科學版);2007年04期

6 杜迎剛;陳家驊;季清娥;;橘小實蠅個體食量測定[J];福建農(nóng)林大學學報(自然科學版);2008年02期

7 伍麗芳;劉淑嫻;;治橘小實蠅 春季最關(guān)鍵[J];農(nóng)藥市場信息;2009年06期

8 杜迎剛;李云玲;季清娥;;啤酒廢酵母酶解生產(chǎn)橘小實蠅引誘蛋白研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學;2012年03期

9 查國賢;郝建華;;橘小實蠅入侵蘇州的風險評估[J];江蘇農(nóng)業(yè)科學;2012年07期

10 屈海學;孫靜雙;;北京地區(qū)橘小實蠅的生活習性觀察[J];中國園藝文摘;2013年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周密;王迎波;肖鐵光;周社文;;橘小實蠅生物學及防治研究[A];依靠科技進步和創(chuàng)新加快發(fā)展現(xiàn)代農(nóng)業(yè)學術(shù)研討會優(yōu)秀論文集[C];2009年

2 黃勝威;邱國強;李金甫;劉元明;楊長舉;張宏宇;;橘小實蠅傳入湖北的風險分析[A];生物入侵與生態(tài)安全——“第一屆全國生物入侵學術(shù)研討會”論文摘要集[C];2007年

3 高強;張宏宇;華紅霞;蔡萬倫;田世堯;楊長舉;;橘小實蠅實驗種群生物學研究[A];生物入侵與生態(tài)安全——“第一屆全國生物入侵學術(shù)研討會”論文摘要集[C];2007年

4 曾玲;陸永躍;林進添;梁廣文;;橘小實蠅的防治策略和技術(shù)[A];科技創(chuàng)新與綠色植�！袊参锉Ｗo學會2006學術(shù)年會論文集[C];2006年

5 沈雪林;徐榮俠;蔡平;張國彪;徐建方;孫振軍;查國賢;;蘇州地區(qū)發(fā)生橘小實蠅危害[A];首屆長三角園藝論壇論文集[C];2007年

6 周灣;施祖華;邱志剛;王建欣;錢軍;林云彪;吳奕峰;吳玉蘭;戚利潮;萬華建;許鳳仙;;浙江杭州市橘小實蠅的發(fā)生與監(jiān)測[A];植物保護與現(xiàn)代農(nóng)業(yè)——中國植物保護學會2007年學術(shù)年會論文集[C];2007年

7 陳力;楊文佳;豆威;王進軍;;橘小實蠅酸性磷酸酯酶生化特性研究[A];植保科技創(chuàng)新與病蟲防控專業(yè)化——中國植物保護學會2011年學術(shù)年會論文集[C];2011年

8 林珠鳳;肖彤斌;芮凱;謝圣華;吉訓聰;秦雙;陳綿才;;土壤處理對橘小實蠅的防治效果[A];植�？萍紕�(chuàng)新與病蟲防控專業(yè)化——中國植物保護學會2011年學術(shù)年會論文集[C];2011年

9 陳連根;朱春剛;夏希納;;上海地區(qū)橘小實蠅生物學特性初步研究[A];中國植物園（第十二期）[C];2009年

10 高強;張宏宇;華紅霞;蔡萬倫;田世堯;楊長舉;;橘小實蠅幼蟲人工飼料研究[A];生物入侵與生態(tài)安全——“第一屆全國生物入侵學術(shù)研討會”論文摘要集[C];2007年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 省植保所 賀淑嵐;掌握發(fā)生規(guī)律 防治橘小實蠅[N];湖南科技報;2007年

2 貝紹國邋崔俊霞;寧波空港截獲橘小實蠅[N];中國國門時報;2008年

3 王丹 陳駿鋒;蘇州局科研項目獲蘇州市科技局立項[N];中國國門時報;2006年

4 記者 溫海龍;十四國專家來榕“取經(jīng)”[N];福州日報;2009年

5 梁煒;山東鴨梨輸美不再需要冷處理[N];中國國門時報;2008年

6 徐瑛;王立紅;歸來勿帶洋水果[N];中國國門時報;2003年

7 憲臣邋通訊員 玉林 全意;煙臺鴨梨重獲競爭力[N];煙臺日報;2008年

8 本報記者 雷光美 通訊員 郭勝鑫 楊志慧 楊特團;綠色防控,現(xiàn)代農(nóng)業(yè)制勝法寶[N];福建日報;2012年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 胡建峰;橘小實蠅監(jiān)測、生物防治及蛋白鉺劑應用機理[D];福建農(nóng)林大學;2012年

2 李曉雪;橘小實蠅RNAi及其對RNAi的免疫耐受機制研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2015年

3 KALEEM TARIQ;MicroRNAs在橘小實蠅精子發(fā)育中的作用研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2015年

4 劉慧;橘小實蠅和番石榴實蠅種間作用的研究[D];華南農(nóng)業(yè)大學;2016年

5 王洪秀;橘小實蠅（Bactrocera dorsalis）成蟲腸道細菌分子多態(tài)性分析及其功能研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2011年

6 耿軍靈;阿里山潛蠅繭蜂大量飼養(yǎng)及對橘小實蠅的控制研究[D];福建農(nóng)林大學;2009年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王旭;湖北武漢橘小實蠅的發(fā)生動態(tài)及入侵來源[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2010年

2 林志強;重慶市沙坪壩區(qū)橘小實蠅種群發(fā)生規(guī)律研究[D];西南大學;2015年

3 鄒聰;inaC基因在橘小實蠅光響應中的功能研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2015年

4 王愛琳;PGRP-LB和PGRP-SB基因在橘小實蠅免疫及腸道微生物調(diào)控中的作用研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2015年

5 柳靜;橘小實蠅精子發(fā)生相關(guān)基因功能研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2015年

6 袁伊e，

本文編號：780323