本文關鍵詞：黑尾葉蟬卵黃原蛋白受體基因cDNA的克隆、序列分析及表達模式

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【摘要】：【目的】卵黃原蛋白受體(vitellogenin receptor,VgR)屬于低密度脂蛋白受體,通過介導內(nèi)吞作用為發(fā)育中的卵母細胞攝取卵黃原蛋白,為胚胎發(fā)育提供營養(yǎng)物質,在昆蟲生殖過程中發(fā)揮關鍵作用。為研究黑尾葉蟬Nephotettix cincticeps VgR(NcVgR)基因的生理功能及其在生殖中的作用,本研究克隆并解析了NcVgR基因的序列,并對其時空表達進行了研究。【方法】根據(jù)黑尾葉蟬轉錄組數(shù)據(jù)信息,利用RT-PCR克隆了NcVgR基因,并進行了生物信息學分析;利用實時熒光定量PCR研究了不同發(fā)育時期、成蟲不同組織NcVgR的表達水平�！窘Y果】NcVgR c DNA序列全長6 676 bp,開放閱讀框長度5 568 bp,編碼1 855個氨基酸,預測編碼蛋白的分子量為206 k D,N端前17個氨基酸為信號肽。序列分析顯示,NcVgR具有低密度脂蛋白家族的5個經(jīng)典保守域,即:配體結合域(ligand-binding domain,LBD)、表皮生長因子前體同源域(EGF-precursor homology domain,EGFP)、O-糖鏈結構域(O-linked sugar domain,OLSD)、跨膜域(transmembrane domain,TMD)和胞質尾域(cytoplasmic domain)。系統(tǒng)發(fā)育分析表明,NcVgR與褐飛虱N.lugens VgR親緣關系最近。實時熒光定量PCR結果顯示,NcVgR轉錄起始時間為5齡若蟲,羽化后轉錄水平逐漸上升,至羽化后8 d達到峰值,隨后下降。有意思的是,隨著黑尾葉蟬產(chǎn)卵,NcVgR轉錄水平再次上升,至羽化后16 d達到最高水平。組織定位結果顯示,NcVgR在黑尾葉蟬雌成蟲卵巢中特異性高表達,而在雌成蟲脂肪體和腸道中微量表達,在雌成蟲腦及雄成蟲中均未檢測到表達�！窘Y論】NcVgR在黑尾葉蟬雌成蟲卵巢中特異性表達,并且不同發(fā)育時期具有不同的表達量,這為研究黑尾葉蟬的生殖調控機理提供了分子信息。
【作者單位】： 浙江大學昆蟲科學研究所農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)昆蟲學重點實驗室;
【關鍵詞】： 黑尾葉蟬 卵黃原蛋白受體 基因克隆 序列分析 表達模式
【基金】：國家重點基礎研究發(fā)展規(guī)劃(“973”計劃)項目(2014CB138404)
【分類號】：Q966
【正文快照】： using RT-PCR according to previous transcriptomic data of N.cincticeps and analyzed by bioinformatic昆蟲卵黃原蛋白受體(vitellogenin receptor,VgR)在雌成蟲成熟卵巢中表達,錨定在生殖細胞膜表面,在卵子發(fā)生過程中,通過介導內(nèi)吞作用將脂肪體合成、分泌到血淋巴中的卵

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本文編號：766036