本文關(guān)鍵詞：煙草中RNA基因沉默抑制子HC-Pro的表達(dá)及鑒定

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【摘要】：農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化的生物技術(shù)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用。蚜傳輔助因子(helper component-proteinase,HC-Pro)是一種RNA沉默抑制子,而HC-Pro蛋白對(duì)植物基因組DNA甲基化的影響及其作用機(jī)制并不十分清楚。我們采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的煙草(Nicotiana benthamiana L.)葉盤轉(zhuǎn)化法將外源基因HC-Pro轉(zhuǎn)化煙草。并優(yōu)化了各種侵染條件,包括農(nóng)桿菌重懸液的濃度,選擇培養(yǎng)基中卡那霉素的濃度和生根培養(yǎng)基中活性炭的比例。此外,我們介紹了一種簡(jiǎn)單而有效的生根技術(shù),即水培生根法,并利用這種技術(shù)快速獲得了HC-Pro轉(zhuǎn)基因株系。半定量RT-PCR(Reverse transcription-PCR)檢測(cè)結(jié)果表明,HC-Pro在轉(zhuǎn)基因煙草及轉(zhuǎn)基因后代植株中穩(wěn)定表達(dá),為HC-Pro蛋白功能的研究提供了實(shí)驗(yàn)幫助。
【作者單位】： 吉林師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;吉林省植物資源科學(xué)與綠色生產(chǎn)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 煙草 葉盤轉(zhuǎn)化法 RNA沉默抑制子 蚜傳輔助因子
【基金】：吉林省科技發(fā)展計(jì)劃青年科研基金項(xiàng)目(20130522182JH) 國(guó)家青年科學(xué)基金項(xiàng)目(31301043) 吉林省教育廳項(xiàng)目吉教科合字([2015]第231號(hào))共同資助
【分類號(hào)】：Q943.2
【正文快照】： *通訊作者,yangliping781124@163.com;348976051@qq.comExpression and Identification of RNA Silencing Supressor HC-Pro in theTobacco PlantsLiu Yuqing1Xu Yanan2Meng Dawei1Liu Lu1Jin Taicheng1Zhou Xiaomei1*Yang Liping1*1 School of life Science,Jilin Normal Uni

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本文編號(hào)：761952