本文關(guān)鍵詞：干擾PTEN基因表達(dá)影響人正常胃黏膜上皮細(xì)胞系GES-1增殖和凋亡

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【摘要】：目的:探討PTEN對(duì)體外培養(yǎng)的人胃黏膜上皮細(xì)胞系GES-1增殖凋亡的影響及其磷酸化通路研究。方法:體外培養(yǎng)GES-1細(xì)胞,構(gòu)建針對(duì)PTEN基因的shRNA慢病毒載體,感染GES-1細(xì)胞系,干擾PTEN的表達(dá),實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組、慢病毒陰性對(duì)照組和干擾PTEN實(shí)驗(yàn)組;熒光顯微鏡、實(shí)時(shí)熒光定量PCR和免疫印跡法檢測(cè)其感染效率;CCK8測(cè)定GES-1細(xì)胞的增殖,流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞的周期和凋亡;實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)GES-1的PTEN、Akt、ERK的mRNA表達(dá)水平;Western blot檢測(cè)GES-1的Akt和磷酸化Akt(p-Akt),ERK1/2及磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)表達(dá)。結(jié)果:干擾PTEN的慢病毒成功感染GES-1,降低了PTEN基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平。與空白對(duì)照組相比,PTEN表達(dá)降低后使G0/G1期的細(xì)胞比率減低,而G2/M和S期細(xì)胞比率增高,同時(shí)凋亡細(xì)胞減少,促進(jìn)GES-1的增殖而抑制其凋亡。p-Akt和p-ERK1/2表達(dá)顯著上調(diào)(P0.05),而對(duì)GES-1的Akt和ERK的mRNA及總蛋白表達(dá)沒有影響(P0.05)。結(jié)論:抑癌基因PTEN可以通過促進(jìn)Akt和ERK的磷酸化,調(diào)節(jié)GES-1細(xì)胞下游的相關(guān)凋亡和信號(hào)通路,進(jìn)而調(diào)節(jié)GES-1的增殖和凋亡。
【作者單位】： 重慶三峽醫(yī)藥高等專科學(xué)校;重慶市抗腫瘤天然藥物工程技術(shù)研究中心;重慶三峽中心醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： PTEN GES- Akt ERK/ 增殖 凋亡
【基金】：重慶市教委科技計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào):KJ111804)
【分類號(hào)】：R730.2
【正文快照】： 近年來,信號(hào)通路成為了腫瘤研究的一大熱點(diǎn),尤其是與腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)的Akt和ERK通路。Akt又稱為蛋白激酶B(PKB),磷酸化的Akt(p-Akt)是其活化形式,并在PI3K/Akt/mTOR/p70S6K通路起重要作用,與腫瘤細(xì)胞增殖凋亡分化,血管新生和轉(zhuǎn)移等多種生物學(xué)功能密切相關(guān)。ERK即細(xì)胞外信

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本文編號(hào)：760041