轉(zhuǎn)基因水稻吉生粳2號(hào)的外源基因旁側(cè)序列分離及事件特異性PCR檢測(cè)方法
發(fā)布時(shí)間:2017-08-29 00:18
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【摘要】:利用染色體步移方法從轉(zhuǎn)基因水稻吉生粳2號(hào)基因組中分離了外源基因T-DNA整合左邊界旁側(cè)序列,長(zhǎng)度為297 bp。通過(guò)對(duì)左邊界旁側(cè)序列的同源性比對(duì)分析定位了外源基因T-DNA在吉生粳2號(hào)基因組中的整合位點(diǎn),為水稻基因組第1號(hào)染色體的第41 607 441 bp處(Gen Bank sequence ID:NC_008394.4)。依據(jù)整合位點(diǎn)右側(cè)設(shè)計(jì)的1條引物和TDNA右邊界設(shè)計(jì)的3條引物分別進(jìn)行PCR擴(kuò)增分離到了右邊界旁側(cè)序列。根據(jù)左邊界旁側(cè)序列和T-DNA整合位點(diǎn),建立了吉生粳2號(hào)事件特異性定性PCR檢測(cè)方法,該方法為轉(zhuǎn)基因水稻吉生粳2號(hào)的身份識(shí)別提供了有效手段。
【作者單位】: 吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究所;
【關(guān)鍵詞】: 轉(zhuǎn)基因水稻 旁側(cè)序列 事件特異性檢測(cè)
【基金】:吉林省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新工程項(xiàng)目(吉教廳[2012]1072號(hào)) 吉林省留學(xué)人員科技創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)項(xiàng)目(RL201322) 吉林省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(20140204014NY) 農(nóng)業(yè)部轉(zhuǎn)基因生物新品種培育科技重大專(zhuān)項(xiàng)(2014ZX08001-001-009)
【分類(lèi)號(hào)】:S511.22
【正文快照】: 水稻是我國(guó)第一大糧食作物,約占糧食總產(chǎn)量的40%[1],年播種面積在2800萬(wàn)~3000萬(wàn)hm2范圍內(nèi)[2]。我國(guó)既是世界最大的水稻生產(chǎn)國(guó),又是最大的水稻消費(fèi)國(guó),隨著人口的增加和耕地的不斷減少,我國(guó)農(nóng)作物的單產(chǎn)需在現(xiàn)有的基礎(chǔ)上提高50%以上才能滿(mǎn)足糧食的安全供給[3]。轉(zhuǎn)基因技術(shù)為水稻
【相似文獻(xiàn)】
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1 袁磊;孫紅煒;楊崇良;尚佑芬;路興波;趙蕾;;轉(zhuǎn)基因玉米MON88017旁側(cè)序列分析及定性PCR檢測(cè)[J];作物學(xué)報(bào);2010年02期
2 汪巧;謝家建;蘇長(zhǎng)青;孫爻;彭于發(fā);;轉(zhuǎn)cry1Ac基因抗蟲(chóng)棉鄂雜棉1號(hào)的旁側(cè)序列和品系特異性檢測(cè)[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào);2011年03期
3 ;[J];;年期
,本文編號(hào):750297
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