本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用TALEN技術(shù)定點(diǎn)突變水稻苯達(dá)松抗性基因CYP81A6

  更多相關(guān)文章： TALEN 水稻 苯達(dá)松 定點(diǎn)突變 嵌合體

【摘要】：基因打靶技術(shù)可以定向改變細(xì)胞或生物遺傳信息,正逐步成為功能基因組學(xué)研究的重要分子生物學(xué)手段。其中,類轉(zhuǎn)錄激活因子效應(yīng)物核酸酶(transcription activator-like effector nuclease,TALEN)技術(shù)已在多個(gè)農(nóng)作物中實(shí)現(xiàn)基因的定點(diǎn)修飾,其已成為作物分子育種一種有效的技術(shù)手段。本研究利用TALEN技術(shù),將水稻(Oryza sativa)基因組中已知的苯達(dá)松(bentazone)抗性基因CYP81A6進(jìn)行定點(diǎn)突變,以創(chuàng)制苯達(dá)松敏感突變體育種材料。通過(guò)農(nóng)桿菌(Agrobacterium tumefaciens)介導(dǎo)轉(zhuǎn)化粳稻品種武運(yùn)粳7號(hào)(Oryza sativa subsp.japonica‘Wuyunjing 7’)愈傷,共獲得110株T0水稻陽(yáng)性轉(zhuǎn)化苗,利用改良的PCR模板快速制備方法并結(jié)合高分辨率溶解曲線(high resolution melting,HRM)檢測(cè)技術(shù)篩選T0代陽(yáng)性植株,獲得3株CYP81A6基因突變體材料,定點(diǎn)突變效率約為2.73%。基因測(cè)序分析及田間測(cè)試結(jié)果表明3株材料存在不同形式的基因序列變異,且均為嵌合體材料。對(duì)T1代群體繼續(xù)進(jìn)行苯達(dá)松敏感測(cè)試,發(fā)現(xiàn)該群體仍會(huì)出現(xiàn)大量的苯達(dá)松敏感植株,但未能篩選到純合突變體。本研究雖未能獲得穩(wěn)定遺傳的苯達(dá)松敏感基因純合水稻突變體材料,但為下一步優(yōu)化試驗(yàn)方案及繼續(xù)篩選突變體積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)。
【作者單位】： 首都師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;深圳市作物分子設(shè)計(jì)育種研究院/深圳市分子設(shè)計(jì)育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;深圳興旺生物種業(yè)有限公司;
【關(guān)鍵詞】： TALEN 水稻 苯達(dá)松 定點(diǎn)突變 嵌合體
【基金】：廣東省引進(jìn)創(chuàng)新科研團(tuán)隊(duì)計(jì)劃資助項(xiàng)目(No.201001S0104725509) 深圳市技術(shù)開(kāi)發(fā)項(xiàng)目(No.CXZZ20140411140647863) 深圳市農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化資金項(xiàng)目(No.NYKJ20140922151049440) 深圳市農(nóng)業(yè)發(fā)展專項(xiàng)(No.201405132333007970)
【分類號(hào)】：S511
【正文快照】：

【參考文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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