本文關(guān)鍵詞：豬CD4基因編碼區(qū)及其剪接體克隆與表達(dá)分析

  更多相關(guān)文章： 豬 白細(xì)胞分化抗原(CD) 基因克隆 選擇性剪接 組織表達(dá)

【摘要】：白細(xì)胞分化抗原4(cluster of differentiation 4,CD4)是一種主要表達(dá)在CD4+細(xì)胞膜上的共受體和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子。CD4分子參與識(shí)別主要組織相容性復(fù)合體(major histocompatibility complex,MHC)Ⅱ類分子,在T淋巴細(xì)胞亞群的發(fā)育、分化以及CD4+細(xì)胞抗原識(shí)別過(guò)程中發(fā)揮重要功能。本研究旨在克隆豬(Sus scrofa)CD4基因及其剪接體編碼區(qū)(coding sequence,CDS),并揭示CD4 m RNA在豬組織中的表達(dá)特征。根據(jù)豬CD4 m RNA序列(Gen Bank登錄號(hào):AY515292),利用反轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcriptionPCR,RT-PCR)擴(kuò)增大白豬CD4基因的編碼區(qū),并分析CD4基因選擇性剪接在不同組織中的表達(dá)情況。同時(shí),用熒光定量PCR(quantitative Real-time PCR,q RT-PCR)分析CD4 m RNA在大白豬不同組織中的表達(dá)譜,以及在大白豬、長(zhǎng)白豬和松遼黑豬3個(gè)免疫組織中的表達(dá)量。結(jié)果顯示,通過(guò)RT-PCR、克隆和測(cè)序,獲得兩種豬CD4編碼序列(Gen Bank登錄號(hào):KC333253和KC333254),其中完整型(1 375 bp)和剪接型(1 252 bp)CD4分別編碼457和397個(gè)氨基酸;兩種CD4編碼序列在豬外周血、胸腺、淋巴結(jié)和脾臟中均有表達(dá),其中完整型CD4的表達(dá)量要高于剪接型。q RT-PCR結(jié)果表明,豬CD4基因在脾臟中的表達(dá)量顯著高于肝臟、胃、腎臟、心臟和肌肉(P0.05);同一免疫組織的CD4 m RNA含量在大白豬、長(zhǎng)白豬和松遼黑豬之間沒(méi)有顯著差異(P0.05),而3個(gè)豬種都是胸腺中的CD4基因表達(dá)量顯著高于在脾臟和淋巴結(jié)中(P0.05)。本研究為進(jìn)一步探究豬CD4基因的結(jié)構(gòu)和功能提供基礎(chǔ)資料。
【作者單位】： 安徽科技學(xué)院動(dòng)物科學(xué)學(xué)院;中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 豬 白細(xì)胞分化抗原(CD) 基因克隆 選擇性剪接 組織表達(dá)
【基金】：安徽省教育廳自然科學(xué)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(No.KJ2016A180) 安徽省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.1608085QC72) 安徽科技學(xué)院獸醫(yī)學(xué)重點(diǎn)學(xué)科經(jīng)費(fèi)項(xiàng)目(No.AKZDXK2015A04) 安徽省生豬產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目(No.AHCYTX-06-10)
【分類號(hào)】：S828
【正文快照】： 230031白細(xì)胞分化抗原4(cluster of differentiation 4,CD4)是一種主要表達(dá)在CD4+細(xì)胞膜上的共受體和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子。成熟的CD4分子是由胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞漿區(qū)構(gòu)成的單鏈跨膜蛋白,其中胞外區(qū)參與識(shí)別主要組織相容性復(fù)合體(major histocom-patibility complex,MHC)Ⅱ類分子(Gra

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