本文關鍵詞：豬CD4基因編碼區(qū)及其剪接體克隆與表達分析

  更多相關文章： 豬 白細胞分化抗原(CD) 基因克隆 選擇性剪接 組織表達

【摘要】：白細胞分化抗原4(cluster of differentiation 4,CD4)是一種主要表達在CD4+細胞膜上的共受體和信號轉導分子。CD4分子參與識別主要組織相容性復合體(major histocompatibility complex,MHC)Ⅱ類分子,在T淋巴細胞亞群的發(fā)育、分化以及CD4+細胞抗原識別過程中發(fā)揮重要功能。本研究旨在克隆豬(Sus scrofa)CD4基因及其剪接體編碼區(qū)(coding sequence,CDS),并揭示CD4 m RNA在豬組織中的表達特征。根據豬CD4 m RNA序列(Gen Bank登錄號:AY515292),利用反轉錄PCR(reverse transcriptionPCR,RT-PCR)擴增大白豬CD4基因的編碼區(qū),并分析CD4基因選擇性剪接在不同組織中的表達情況。同時,用熒光定量PCR(quantitative Real-time PCR,q RT-PCR)分析CD4 m RNA在大白豬不同組織中的表達譜,以及在大白豬、長白豬和松遼黑豬3個免疫組織中的表達量。結果顯示,通過RT-PCR、克隆和測序,獲得兩種豬CD4編碼序列(Gen Bank登錄號:KC333253和KC333254),其中完整型(1 375 bp)和剪接型(1 252 bp)CD4分別編碼457和397個氨基酸;兩種CD4編碼序列在豬外周血、胸腺、淋巴結和脾臟中均有表達,其中完整型CD4的表達量要高于剪接型。q RT-PCR結果表明,豬CD4基因在脾臟中的表達量顯著高于肝臟、胃、腎臟、心臟和肌肉(P0.05);同一免疫組織的CD4 m RNA含量在大白豬、長白豬和松遼黑豬之間沒有顯著差異(P0.05),而3個豬種都是胸腺中的CD4基因表達量顯著高于在脾臟和淋巴結中(P0.05)。本研究為進一步探究豬CD4基因的結構和功能提供基礎資料。
【作者單位】： 安徽科技學院動物科學學院;中國農業(yè)大學動物科技學院;安徽省農業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所;
【關鍵詞】： 豬 白細胞分化抗原(CD) 基因克隆 選擇性剪接 組織表達
【基金】：安徽省教育廳自然科學研究重點項目(No.KJ2016A180) 安徽省自然科學基金項目(No.1608085QC72) 安徽科技學院獸醫(yī)學重點學科經費項目(No.AKZDXK2015A04) 安徽省生豬產業(yè)技術體系項目(No.AHCYTX-06-10)
【分類號】：S828
【正文快照】： 230031白細胞分化抗原4(cluster of differentiation 4,CD4)是一種主要表達在CD4+細胞膜上的共受體和信號轉導分子。成熟的CD4分子是由胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞漿區(qū)構成的單鏈跨膜蛋白,其中胞外區(qū)參與識別主要組織相容性復合體(major histocom-patibility complex,MHC)Ⅱ類分子(Gra

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