本文關(guān)鍵詞：金鐵鎖β-actin基因克隆及其作為內(nèi)參基因的研究

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【摘要】：目的:建立金鐵鎖β-actin基因?qū)崟r熒光定量PCR方法,為金鐵鎖實時熒光定量PCR的檢測提供了內(nèi)參基因。方法:根據(jù)Gen Bank上β-actin基因保守區(qū)域設(shè)計特異性引物,利用PCR擴增的方法擴增β-actin目的片段。并以β-actin作為內(nèi)參基因,利用熒光定量PCR技術(shù)對糖基轉(zhuǎn)移酶基因(UGT)在金鐵鎖根、莖、葉組織中的表達情況進行分析。結(jié)果:擴增到金鐵鎖的β-actin基因序列,長度為153 bp,與王不留行、鵝腸菜、馬齒莧的β-actin有較高的同源性。而糖基轉(zhuǎn)移酶基因在以β-actin作為內(nèi)參基因時能夠在金鐵鎖的不同組織穩(wěn)定表達。結(jié)論:金鐵鎖β-actin基因是一個可靠的內(nèi)參基因,適合在金鐵鎖三萜皂苷生物合成相關(guān)功能基因的表達研究中作為內(nèi)參基因。
【作者單位】： 云南中醫(yī)學院中藥材優(yōu)良種苗繁育工程中心;
【關(guān)鍵詞】： 金鐵鎖 β-actin 實時熒光定量PCR TapMan探針
【基金】：國家自然科學基金(81260609) 云南省教育廳重點項目(2015119);云南省教育廳科學研究基金(2015J101)
【分類號】：S567.239
【正文快照】： 金鐵鎖Psammosilene tunicoides W.C.Wu et C.Y.Wu是云南白藥等中成藥的重要原料藥。其藥用有效活性成分為齊墩果烷型三萜皂苷〔1,2〕,具有鎮(zhèn)痛、抗炎等顯著藥理活性〔3,4〕。近年來,與金鐵鎖三萜皂苷有效成分合成相關(guān)的關(guān)鍵酶基因逐漸被挖掘。對挖掘到的這些基因進行熒光定量

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本文編號：691936