發(fā)布時(shí)間：2017-08-18 01:06

  本文關(guān)鍵詞：金鐵鎖β-actin基因克隆及其作為內(nèi)參基因的研究

  更多相關(guān)文章： 金鐵鎖 β-actin 實(shí)時(shí)熒光定量PCR TapMan探針

【摘要】：目的:建立金鐵鎖β-actin基因?qū)崟r(shí)熒光定量PCR方法,為金鐵鎖實(shí)時(shí)熒光定量PCR的檢測提供了內(nèi)參基因。方法:根據(jù)Gen Bank上β-actin基因保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物,利用PCR擴(kuò)增的方法擴(kuò)增β-actin目的片段。并以β-actin作為內(nèi)參基因,利用熒光定量PCR技術(shù)對(duì)糖基轉(zhuǎn)移酶基因(UGT)在金鐵鎖根、莖、葉組織中的表達(dá)情況進(jìn)行分析。結(jié)果:擴(kuò)增到金鐵鎖的β-actin基因序列,長度為153 bp,與王不留行、鵝腸菜、馬齒莧的β-actin有較高的同源性。而糖基轉(zhuǎn)移酶基因在以β-actin作為內(nèi)參基因時(shí)能夠在金鐵鎖的不同組織穩(wěn)定表達(dá)。結(jié)論:金鐵鎖β-actin基因是一個(gè)可靠的內(nèi)參基因,適合在金鐵鎖三萜皂苷生物合成相關(guān)功能基因的表達(dá)研究中作為內(nèi)參基因。
【作者單位】： 云南中醫(yī)學(xué)院中藥材優(yōu)良種苗繁育工程中心;
【關(guān)鍵詞】： 金鐵鎖 β-actin 實(shí)時(shí)熒光定量PCR TapMan探針
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81260609) 云南省教育廳重點(diǎn)項(xiàng)目(2015119);云南省教育廳科學(xué)研究基金(2015J101)
【分類號(hào)】：S567.239
【正文快照】： 金鐵鎖Psammosilene tunicoides W.C.Wu et C.Y.Wu是云南白藥等中成藥的重要原料藥。其藥用有效活性成分為齊墩果烷型三萜皂苷〔1,2〕,具有鎮(zhèn)痛、抗炎等顯著藥理活性〔3,4〕。近年來,與金鐵鎖三萜皂苷有效成分合成相關(guān)的關(guān)鍵酶基因逐漸被挖掘。對(duì)挖掘到的這些基因進(jìn)行熒光定量

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本文編號(hào)：691936