凡納濱對蝦TOR蛋白下游信號傳導(dǎo)因子eIF4E2和eIF4E1A基因克隆與功能分析
發(fā)布時間:2017-08-11 23:14
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【摘要】:為研究mTOR信號通路在凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)氨基酸代謝中的調(diào)控作用,本研究利用RACE技術(shù)首次克隆獲得了凡納濱對蝦肌肉組織中eif4e2和eif4e1a基因的全長c DNA序列。eif4e2基因c DNA序列全長1 069 bp,開放閱讀框699 bp,編碼232個氨基酸;eif4e1a基因c DNA序列全長3579bp,開放閱讀框627bp,編碼208個氨基酸。氨基酸序列比對和進化分析均證實eIF4E2和eIF4E1A為目前已知的eIF4E家族蛋白的同源蛋白。利用實時熒光定量PCR的方法研究了eif4e2和eif4e1a基因在凡納濱對蝦不同組織中的表達差異以及注射雷帕霉素或氨基酸后肌肉中eif4e2和eif4e1a基因表達量的變化情況,探討了eif4e2和eif4e1a基因在細胞生長中的調(diào)控作用。結(jié)果表明,凡納濱對蝦eif4e2和eif4e1a基因在眼柄、肝胰臟、腸道、胃、鰓絲和肌肉等組織中均有表達;其中eif4e2基因在肌肉中的表達量顯著高于其他組織(P0.05),eif4e1a基因在腸道和肌肉中都有較高表達量,且在腸道中的表達量顯著高于其在肌肉中的表達量(P0.05);注射雷帕霉素后2 h內(nèi)肌肉中eif4e2和eif4e1a基因表達量都出現(xiàn)顯著下降(P0.05);肌肉中eif4e1a基因的表達量在單獨注射亮氨酸或精氨酸4 h內(nèi)均未出現(xiàn)變化,但在同時注射亮氨酸和精氨酸后表達量顯著增加(P0.05);肌肉中eif4e2基因在注射亮氨酸、精氨酸及亮氨酸加精氨酸后表達量都明顯提高(P0.05),且同時注射亮氨酸和精氨酸后,基因表達變量明顯比單獨注射亮氨酸或精氨酸后變化量大。本研究從動物分子營養(yǎng)學(xué)角度出發(fā),克隆了凡納濱對蝦mTOR信號通路中eif4e2和eif4e1a兩個基因,并證明其能夠通過mTOR信號通路接收不同氨基酸信號來調(diào)控細胞生長,對于深入了解對蝦的生長和代謝調(diào)控機制、飼料配方的優(yōu)化以及建立合理的養(yǎng)殖管理模式都具有重要的意義。
【作者單位】: 中國科學(xué)院海洋研究所實驗海洋生物學(xué)重點實驗室青島海洋科學(xué)與技術(shù)國家實驗室海洋生物學(xué)與生物技術(shù)功能實驗室;中國科學(xué)院大學(xué);
【關(guān)鍵詞】: eIFE 凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei) mTOR 氨基酸 生長
【基金】:國家自然科學(xué)基金項目(41406151)~~
【分類號】:S917.4
【正文快照】: 動物細胞生長調(diào)控是一個受多因素影響的復(fù)雜過程,它不僅受到動物生長不同時期的限制,營養(yǎng)條件等細胞內(nèi)外環(huán)境條件也都是重要的影響因素。只有在營養(yǎng)元素充足且外界理化條件合適的情況下,動物細胞才能進行快速的營養(yǎng)代謝,并獲得最快生長[1]。在機體細胞中,m TOR(mechanistic ta
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1 林惠山;戚雋淵;喬燕平;;凡納濱對蝦高產(chǎn)養(yǎng)殖水質(zhì)優(yōu)化技術(shù)探討[J];水產(chǎn)科技情報;2006年04期
2 衣萌萌;于赫男;林小濤;許忠能;周小壯;;密度脅迫下凡納濱對蝦的行為與生理變化[J];暨南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版);2012年01期
3 周歧存,丁q,
本文編號:658662
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