本文關(guān)鍵詞：三七幾丁質(zhì)酶基因PnCHI1的克隆及表達(dá)特性分析

  更多相關(guān)文章： 三七 幾丁質(zhì)酶 基因克隆 茄腐鐮刀菌 人參鏈格孢 防衛(wèi)反應(yīng)

【摘要】：幾丁質(zhì)酶(chitinase,EC3.2.1.14)廣泛存在于多種生物體中,催化水解幾丁質(zhì)(chitin),在抗真菌防衛(wèi)反應(yīng)體系中具有重要作用,同時幾丁質(zhì)酶還調(diào)控植物的生長和發(fā)育,參與細(xì)胞的程序性死亡(programmed cell death,PCD)。該實驗基于三七Panax notoginseng中編碼幾丁質(zhì)酶的EST序列設(shè)計引物,采用快速擴(kuò)增cDNA末端技術(shù),克隆得到1個新的幾丁質(zhì)酶基因的全長cDNA序列,命名為PnCHI1。PnCHI1的cDNA全長為1 022 bp,含有822 bp的開放閱讀框,26 bp 5'-非翻譯區(qū)以及174bp的3'-非翻譯區(qū),編碼具有273個氨基酸的蛋白質(zhì)。該基因編碼的蛋白屬于糖苷水解酶19家族成員,進(jìn)化樹分析表明PnCHI1編碼的氨基酸序列屬于IV類幾丁質(zhì)酶。qRT-PCR分析結(jié)果顯示,植物信號分子水楊酸、茉莉酸甲酯、H_2O_2和乙烯處理可均明顯誘導(dǎo)三七根中PnCHI1的轉(zhuǎn)錄水平;三七葉片接種人參鏈格孢Altemaria panax后,PnCHI1的表達(dá)量迅速升高,呈波動上升趨勢;外源茉莉酸甲酯預(yù)處理三七根部,PnCHI1的表達(dá)水平上升,接種茄腐鐮刀菌Fusarium solani后,PnCHI1的轉(zhuǎn)錄水平急劇上升,接種后4 h達(dá)到最高轉(zhuǎn)錄水平;而無菌水預(yù)處理三七受茄腐鐮刀菌侵染過程中,PnCHI1的表達(dá)量逐漸上升,至48h達(dá)到最大值。上述結(jié)果表明PnCHI1參與三七對根腐病菌以及黑斑病菌的防衛(wèi)反應(yīng)。
【作者單位】： 昆明理工大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 三七 幾丁質(zhì)酶 基因克隆 茄腐鐮刀菌 人參鏈格孢 防衛(wèi)反應(yīng)
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(81560610) 云南省應(yīng)用基礎(chǔ)研究計劃項目(2013FA031,2014FA003)
【分類號】：S435.672
【正文快照】： 植物在生長發(fā)育過程中會遭受多種生物和非生物因子的脅迫,如干旱、寒冷、UV射線、創(chuàng)傷、病原物(真菌、細(xì)菌、病毒)侵染等,為此植物進(jìn)化出一系列防御機(jī)制來抵御逆境脅迫,病程相關(guān)蛋白(pathogenesis-related protein,PR)的激活和積累是植物防御反應(yīng)的重要組成部分[1]。植物表達(dá)

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本文編號：652502