本文關鍵詞：siRNA沉默Twist基因?qū)Y直腸癌細胞順鉑化療敏感性的影響

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【摘要】：目的結直腸癌(colorectal cancer,CRC)是世界范圍內(nèi)最常見的惡性腫瘤之一,本研究探討應用小分子干擾RNA(siRNA)沉默Twist信號通路對結直腸癌順鉑化療敏感性的影響及其可能機制。方法 0、0.0625、0.125、0.25、0.5和1μg/mL的順鉑作用于SW480和LoVo這種結直腸癌細胞株48h。Twist-siRNA轉(zhuǎn)染這2種結直腸癌細胞株。CCK-8法計算轉(zhuǎn)染前后順鉑對于兩者的抑制率。EdU法檢測癌細胞增殖能力。Hoechest 3344熒光染色檢測細胞形態(tài)。蛋白印跡法檢測不同藥物作用下的Twist及上皮間質(zhì)化相關標志物的表達變化。結果 LoVo和SW480細胞組中Twist表達量分別為0.824±0.124和0.191±0.039 9;Twist在LoVo中高表達,在SW480中低表達,差異有統(tǒng)計學意義,P0.05。SW480和LoVo對于順鉑的IC50值分別為(3.394±0.083)和(6.737±0.796)μg/mL,P0.05。wist siRNA干擾后SW480和LoVo對于順鉑的IC50值分別為(0.113 7±0.008 8)和(0.459 7±0.025 0)μg/mL,與單用順鉑組相比,差異均有統(tǒng)計學意義,均P0.05。Hoechest3344熒光染色結果表明,Twist轉(zhuǎn)染組比未轉(zhuǎn)染組出現(xiàn)了更加明顯的細胞凋亡形態(tài)變化。CCK-8檢測結果顯示,采用Twist siRNA干擾后SW480和LoVo對于順鉑的IC50值分別為(0.113 7±0.008 8)和(0.459 7±0.025 0)μg/mL,與單用順鉑組相比,差異有統(tǒng)計學意義,P0.05。EdU法檢測結果顯示,Twist siRNA+順鉑組、順鉑組和正常組SW480細胞增殖率分別為(14.63±1.33)%、(25.55±1.73)%和(51.23±3.31)%;LoVo細胞增殖率分別為(22.35±2.39)%、(29.27±1.85)%和(64.62±3.61)%;與正常組和單用順鉑組相比,Twist siRNA+順鉑組的細胞增殖率明顯降低,差異均有統(tǒng)計學意義,均P0.05。蛋白印跡法結果表明,Twist siRNA作用的同時伴隨E-cadherin表達升高,而Vimentin表達降低,差異有統(tǒng)計學意義,P0.05。結論應用siRNA降低Twist信號通路活性可通過抑制上皮間質(zhì)化過程而增加結直腸癌對于順鉑的化療敏感性。
【作者單位】： 嘉興市第一醫(yī)院腫瘤外科;
【關鍵詞】： 結直腸癌 Twist siRNA 上皮間質(zhì)化 順鉑
【基金】：浙江省嘉興市科技局項目(2013AY21042-4) 嘉興市普通外科學基金(04-F-15)
【分類號】：R735.34
【正文快照】： 中華腫瘤防治雜志,2016,23(8):493-498Chin J Cancer Prev Treat,2016,23(8):493-498結直腸癌(colorectal cancer,CRC)是世界范圍內(nèi)最常見的惡性腫瘤之一,在西方發(fā)達國家其致死率居惡性腫瘤的第2位[1]。在我國,由于生活水平的提高和環(huán)境污染,每年新發(fā)CRC患者呈明顯遞增趨勢。

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本文編號：644023