本文關(guān)鍵詞：反義RNA干擾MSTN對牛肌肉衛(wèi)星細胞脂肪生成相關(guān)基因的影響

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【摘要】：肌肉生長抑制素(myostatin,MSTN)屬于轉(zhuǎn)化生長因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)超家族成員,在骨骼肌中高表達;敲除MSTN后,肌肉質(zhì)量增加、脂肪含量變少,但抑制MSTN表達后,如何影響脂肪沉積,尚未研究清楚。為了探究抑制MSTN表達后對脂肪相關(guān)基因表達的影響,本研究利用反義RNA技術(shù),成功構(gòu)建了雙向表達載體p MSTN-CMV-CAG-anti MSTN,并通過Western blot篩選出抑制效果最佳的MSTN的反義載體。利用最佳反義MSTN載體在牛(Bos taurus)肌肉衛(wèi)星細胞中有效干擾MSTN表達后,檢測了脂肪合成相關(guān)基因(脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FASN),乙酰Co A羧化酶(acetyl-Co A carboxylase,ACC)和硬脂酰輔酶A去飽和酶1(stearoyl-Co A desaturase-1,SCD-1))、脂肪酸氧化分解相關(guān)基因(肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶IB(carnitine palmitoyltransferase 1b,CPT-IB),乙酰輔酶A氧化酶(acyl-Co A oxidase,ACOX1)和烯酰輔酶A水合酶(enoyl-Co A hydratase 1,ECHDC1))以及脂肪轉(zhuǎn)運蛋白(fatty acid transport proteins,FATP)表達的變化。結(jié)果顯示,在MSTN基因被干擾后,肌肉衛(wèi)星細胞中脂肪酸合成相關(guān)基因表達量上調(diào),脂肪氧化分解相關(guān)基因中ACOX1和CPT-1B表達量上調(diào),而ECHDC1基因表達量下調(diào),另外,FATP表達基本沒有變化。MSTN功能缺失后,脂肪合成和脂肪氧化分解過程都得到了加強,所以MSTN敲除所導(dǎo)致的脂肪減少并不是由于抑制了脂肪合成,而是由于脂肪分解加強,為肌肉提供更多的能量。MSTN下調(diào)后,CPT-1B的表達上調(diào)最為顯著,而CPT-1B是脂肪酸β氧化的關(guān)鍵基因,所以研究結(jié)果提示MSTN對于脂肪的影響主要是通過影響β氧化過程實現(xiàn)的。研究結(jié)果為MSTN下調(diào)所導(dǎo)致的脂肪含量下降提供了理論依據(jù),為MSTN作用于脂肪沉積的機制做出了初步探討。
【作者單位】： 內(nèi)蒙古大學(xué)哺乳動物生殖生物學(xué)及生物技術(shù)教育部重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 肌肉生長抑制素(MSTN) 反義RNA 牛肌肉衛(wèi)星細胞 脂肪沉積
【基金】：國家科技重大專項(No.2015ZX08007-002)
【分類號】：S823
【正文快照】： 肌肉生長抑制素(myostatin,MSTN),也稱生長分化因子8(growth/differentiation factor-8,GDF8),屬于轉(zhuǎn)化生長因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)超家族,是骨骼肌生長和發(fā)育的負調(diào)控因子,會抑制骨骼肌的生長和發(fā)育。Mc Pherron等(1997)首次制備了MSTN基因敲除小鼠(Mus

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本文編號：643404