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革胡子鯰MHC基因表達(dá)qPCR分析的引物設(shè)計與評估

發(fā)布時間:2017-08-08 19:01

  本文關(guān)鍵詞:革胡子鯰MHC基因表達(dá)qPCR分析的引物設(shè)計與評估


  更多相關(guān)文章: 革胡子鯰 主要組織相容性復(fù)合體 實時熒光定量PCR 融解曲線 擴(kuò)增效率


【摘要】:為應(yīng)用實時熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)分析革胡子鯰主要組織相容性復(fù)合體(major histocompatibility complex,MHC)基因的表達(dá)譜,本研究利用Primer 5軟件設(shè)計擴(kuò)增革胡子鯰MHC基因片段的引物并進(jìn)行qPCR評估。結(jié)果顯示:引物MHCF1-MHCR3在qPCR擴(kuò)增時,融解曲線為單一尖銳峰;標(biāo)準(zhǔn)曲線分析顯示:引物的擴(kuò)增效率為99.3%,R2值為0.998。上述結(jié)果說明該對引物具有良好的擴(kuò)增特異性和擴(kuò)增效率,滿足了qPCR擴(kuò)增的要求。本研究為革胡子鯰MHCⅠ基因表達(dá)的qPCR分析奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 天津農(nóng)學(xué)院水產(chǎn)學(xué)院天津市水產(chǎn)生態(tài)及養(yǎng)殖重點實驗室;天津海友佳音生物科技股份有限公司;天津農(nóng)學(xué)院基礎(chǔ)科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】革胡子鯰 主要組織相容性復(fù)合體 實時熒光定量PCR 融解曲線 擴(kuò)增效率
【基金】:天津市應(yīng)用基礎(chǔ)與前沿技術(shù)研究計劃(重點項目)“革胡子鯰抗菌肽提取與鑒別及非特異免疫因子的分子解析”(15JCZDJC33500) 天津農(nóng)學(xué)院中青年骨干創(chuàng)新人才培養(yǎng)計劃“漁業(yè)資源利用與生態(tài)修復(fù)”(無編號)
【分類號】:S917.4
【正文快照】: 主要組織相容性復(fù)合體(major histocompatibilitycomplex,MHC)是由位于染色體上高度多態(tài)、緊密連鎖的基因位點組成;在機(jī)體的特異性免疫中發(fā)揮重要作用的基因家族[1-2]。魚類的MHC主要包括MHCⅠ和MHCⅡ兩類分子,分別負(fù)責(zé)內(nèi)源性和外源性抗原的加工和呈遞,與疾病的抗性和易感性密

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