能源橡膠草GGPPS基因啟動子的克隆及瞬時表達研究
發(fā)布時間:2017-08-08 16:37
本文關鍵詞:能源橡膠草GGPPS基因啟動子的克隆及瞬時表達研究
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【摘要】:以多年生宿根型草本植物橡膠草為材料,根據(jù)已獲得的橡膠草r{牛兒基r{牛兒基焦磷酸合酶(geranylgeranyl pyrophosphate synthase,GGPPS)基因序列設計引物,采用TAIL-PCR擴增到GGPPS基因5′上游大小為1131bp的序列。采用PlantCare和PLACE軟件分析,表明該序列不僅具有啟動子的基本元件,同時還有與多個器官特異表達元件以及與脅迫相關的順式作用元件,命名為pTkGGPPS(GenBank:KT901796)。將該序列代替pCAMBIA1304質(zhì)粒上的CaMV 35S啟動子序列,以GFP基因作為報告基因,構建pCAMBIA1304-pTkGGPPS-GFP植物表達載體,利用農(nóng)桿菌介導法轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細胞,結果表明,該啟動子能夠驅(qū)動GFP基因表達,具有一定的活性。TkGGPPS基因啟動子克隆及瞬時表達為橡膠草中橡膠合成及組織特異性研究奠定了基礎。
【作者單位】: 石河子大學生命科學學院;
【關鍵詞】: 橡膠草 GGPPS基因 TAIL-PCR 啟動子 序列分析 瞬時表達
【基金】:國家自然科學基金(No.31360060)資助
【分類號】:S576
【正文快照】: pression啟動子是位于結構基因5′端上游的DNA序列,能夠活化RNA聚合酶,使之與模板DNA準確結合并具有轉(zhuǎn)錄起始特異性。啟動子(promoters)就像“開關”,決定轉(zhuǎn)錄的方向和效率,控制基因表達的起始時間、空間和表達程度。目前,大多數(shù)轉(zhuǎn)基因植物所用的啟動子是組成型啟動子(如煙草,
本文編號:640959
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