本文關(guān)鍵詞：抗CD146抗體在異基因造血干細(xì)胞移植后急性移植物抗宿主病中的作用及機(jī)制研究

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【摘要】：目的:探討抗CD146抗體AA98在異基因造血干細(xì)胞移植后急性移植物抗宿主病(acute graft versus host disease,aGVHD)進(jìn)程中的作用。方法:將純化的AA98抗體以及對(duì)照抗體AA1采用清除內(nèi)毒素的柱子進(jìn)行內(nèi)毒素清除,檢測(cè)清除前后內(nèi)毒素水平,并對(duì)成功清除內(nèi)毒素的抗體測(cè)定濃度。BALB/c(H2Kd)受體小鼠接受1050cGy全身性致死性輻照,通過(guò)尾靜脈注射的方法輸注1×107 C57BL/6(H2Kb)小鼠來(lái)源的骨髓細(xì)胞和5×106全脾細(xì)胞,建立aGVHD模型。于異基因造血干細(xì)胞移植后第5天,流式檢測(cè)小鼠臟器中CD146的表達(dá)。從移植第0天(day 0)至移植后第6天(day 6)每隔一天給小鼠腹腔注射AA98抗體(200μg/只),對(duì)照組注射相同劑量的IgG抗體或AA1抗體(抗CD146對(duì)照抗體)。觀察小鼠生存和體重變化,記錄aGVHD積分。移植后第7天采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)受體小鼠的脾臟、肝臟、肺和小腸四個(gè)臟器中的免疫細(xì)胞的表型。結(jié)果:有效清除了AA1和AA98抗體中的內(nèi)毒素,使內(nèi)毒素水平降到了10EU/ml以內(nèi),得到可用于注射aGVHD小鼠的抗體。aGVHD小鼠臟器中CD146的表達(dá)顯著高于骨髓移植對(duì)照組。aGVHD生存實(shí)驗(yàn)表明,AA98能顯著抑制異基因造血干細(xì)胞移植后aGVHD的發(fā)展,延長(zhǎng)aGVHD小鼠的生存但不能阻止aGVHD的發(fā)生:AA98顯著延長(zhǎng)aGVHD小鼠存活時(shí)間;顯著減輕aGVHD小鼠的體重下降;減輕小鼠aGVHD臨床癥狀,降低臨床積分。流式結(jié)果顯示AA98能減少T細(xì)胞的活化而不影響T細(xì)胞的浸潤(rùn);AA98顯著下調(diào)小鼠脾臟中CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞中IFN-γ和TNF-α的分泌。結(jié)論:AA98能顯著抑制aGVHD的發(fā)展但不能阻止其發(fā)生,其機(jī)制可能是通過(guò)抑制T細(xì)胞活化以及其細(xì)胞因子的分泌。
【關(guān)鍵詞】：CD146 AA98 aGVHD T細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R457.7
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-9
• 前言9-14
• 參考文獻(xiàn)11-14
• 材料與方法14-27
• 一、實(shí)驗(yàn)材料14-17
• 1、動(dòng)物14
• 2、主要試劑及耗材14-16
• 3、主要儀器設(shè)備16-17
• 二、實(shí)驗(yàn)方法17-27
• 1、抗體濃度測(cè)定17
• 2、內(nèi)毒素清除17-18
• 3、內(nèi)毒素水平檢測(cè)18-21
• 4、制備骨髓細(xì)胞和脾細(xì)胞21
• 5、異基因造血干細(xì)胞移植后aGVHD模型的建立21-22
• 6、收集小鼠脾臟、腸系膜淋巴結(jié)、肝臟、肺和小腸，制備單細(xì)胞懸液22-25
• 7、流式細(xì)胞表面染色25
• 8、流式細(xì)胞胞內(nèi)染色25-26
• 9、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析26-27
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-39
• 一、AA98抗體與AA1抗體的內(nèi)毒素檢測(cè)27-28
• 二、AA98抗體及AA1抗體濃度測(cè)定28
• 三、AA98抗體及AA1抗體內(nèi)毒素清除28-29
• 四、BALB/c小鼠清髓性輻照劑量的確定29-30
• 五、aGVHD模型中T細(xì)胞與NK、DC細(xì)胞的CD146有高表達(dá)30-31
• 六、AA98能抑制aGVHD但不能完全阻止aGVHD的發(fā)生31-33
• 七、AA98不影響CD4+T細(xì)胞、CD8+T細(xì)胞在aGVHD靶器官的浸潤(rùn)33-34
• 八、AA98抑制受體鼠肝臟中CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞的活化34-35
• 九、AA98不影響髓系細(xì)胞在靶器官中的浸潤(rùn)35-36
• 十、AA98減少受體鼠脾臟中CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞IFN-γ、TNF-α 的分泌36-39
• 討論39-41
• 參考文獻(xiàn)41-44
• 綜述 CD146在腫瘤發(fā)展中作用的研究進(jìn)展44-56
• 參考文獻(xiàn)49-56
• 攻讀學(xué)位期間本人出版或公開(kāi)發(fā)表的論著、論文56-57
• 附錄57-60
• 致謝60-62

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2 汪年松;王鋒;范瑛;喻明;;2型糖尿病患者血漿CD146水平測(cè)定的臨床意義[J];中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué);2007年12期

3 王起武;查斌;王章才;;CD146及腫瘤微血管密度與前列腺癌關(guān)系的研究[J];皖南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2007年02期

4 王起武;王慶堂;楊航;王亮;王章才;趙友光;;CD146、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子與前列腺癌血管生成關(guān)系的研究[J];現(xiàn)代泌尿生殖腫瘤雜志;2011年02期

5 馬建華 ,白進(jìn)良 ,傅梧 ,楊曉春;CD146與前列腺癌微血管生成關(guān)系的研究[J];中國(guó)男科學(xué)雜志;2005年04期

6 王鋒;汪年松;高許萍;范瑛;;聯(lián)合檢測(cè)CD146與P-選擇素對(duì)2型糖尿病腎病的意義[J];海南醫(yī)學(xué);2012年11期

7 魏曉龍;羅香蓉;白靜雯;席迪迪;;CD146在乳腺癌中的表達(dá)及意義[J];汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2014年02期

8 樊靜;任紅;岳秀杰;景曉春;李建柱;康文喜;張鳳春;;CD105和CD146在乳腺癌組織中的表達(dá)[J];海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2011年12期

9 孫敏;王以新;;CD146在多種腫瘤中的表達(dá)與作用[J];中國(guó)醫(yī)藥科學(xué);2012年04期

10 郭瑞華;;CD146蛋白在胰腺癌中的表達(dá)及其臨床意義[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生;2011年20期

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1 馬曉黎;;T淋巴瘤組織中CD146的表達(dá)及意義[A];第12屆全國(guó)實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會(huì)議論文摘要[C];2009年

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1 郭靈華;抗CD146抗體在異基因造血干細(xì)胞移植后急性移植物抗宿主病中的作用及機(jī)制研究[D];蘇州大學(xué);2016年

2 范樹(shù)穎;血清CD146在小兒原發(fā)性腎病綜合征的水平及臨床意義[D];天津醫(yī)科大學(xué);2011年

3 劉培培;IgA腎病患者腎組織及外周血中CD146的表達(dá)及意義[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2010年

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本文編號(hào)：640806