本文關(guān)鍵詞：芋頭過(guò)氧化物酶基因克隆

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【摘要】：根據(jù)芋頭的密碼子使用頻率,用i CODEHOP設(shè)計(jì)簡(jiǎn)并引物擴(kuò)增芋頭過(guò)氧化物酶基因序列,待芋頭過(guò)氧化物酶基因非側(cè)翼序列擴(kuò)增成功后,依據(jù)其序列合成hiTAIL-PCR引物擴(kuò)增芋頭過(guò)氧化物酶基因的兩側(cè)序列。結(jié)果從芋頭基因組DNA中克隆出1 165 bp序列,經(jīng)同源性分析為過(guò)氧化物酶基因的部分序列;再利用hiTAIL-PCR技術(shù)可以擴(kuò)增出芋頭過(guò)氧化物酶基因的兩側(cè)序列,擴(kuò)增序列為689 bp,測(cè)序結(jié)果能與1 165 bp序列拼接到一起,長(zhǎng)1 854 bp。與已知的過(guò)氧化物酶進(jìn)行序列比對(duì),發(fā)現(xiàn)兩側(cè)還有氨基酸的編碼序列,因此進(jìn)行第2次hiTAIL-PCR,擴(kuò)增出165 bp芋頭過(guò)氧化物酶基因的側(cè)翼序列,拼接后得到2 019bp。用Softberry上的基因預(yù)測(cè)軟件分析后,發(fā)現(xiàn)包含過(guò)氧化物酶4個(gè)外顯子,同源性分析表明,此過(guò)氧化物酶基因?yàn)楹t素的第三類過(guò)氧化物酶。
【作者單位】： 廣東海洋大學(xué)農(nóng)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 芋頭 過(guò)氧化物酶基因 hiTAIL-PCR 克隆
【基金】：國(guó)家公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)子課題分項(xiàng)目(200903017-08)
【分類號(hào)】：S632.3;Q943.2
【正文快照】： 芋頭(Colocasia esculenta)主要種植于熱帶地區(qū),在東南亞和太平洋地區(qū)是一種重要的經(jīng)濟(jì)作物。2016年國(guó)際糧農(nóng)組織報(bào)告,2004—2014年期間,我國(guó)的芋頭年均生產(chǎn)量居全球第在大多數(shù)情況下獲得的主要產(chǎn)物片段為1~3kb[12]。hi TAIL-PCR技術(shù)非常實(shí)用[13-16]。例如,郭翠等[14]通過(guò)一次

【相似文獻(xiàn)】

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