KdLEC1及GbLEC1轉(zhuǎn)基因棉花再生植株的獲得
發(fā)布時(shí)間:2017-08-07 11:22
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【摘要】:為了探究LEC1基因?qū)γ藁w細(xì)胞胚胎發(fā)生的影響,本研究利用地塞米松(DEX)誘導(dǎo)型表達(dá)載體p INDEX3,通過農(nóng)桿菌分別介導(dǎo)大葉落地生根短缺的LEC1(Kd LEC1)在新海15號下胚軸以及棉花的兩個(gè)LEC1基因家族(Gb LEC1A,Gb LEC1B)和Kd LEC1在新陸早33號胚性愈傷組織中的遺傳轉(zhuǎn)化,體胚誘導(dǎo)及再生過程,獲得Kd LEC1、Gb LEC1A、Gb LEC1B轉(zhuǎn)基因植株。同時(shí)以Kd LEC1轉(zhuǎn)基因新海15號胚性愈傷組織系為試材,分別進(jìn)行DEX和無DEX的懸浮誘導(dǎo)處理,實(shí)時(shí)定量PCR分析Kd LEC1的相對表達(dá)量。研究表明:經(jīng)為期13個(gè)月的植株再生過程和PCR鑒定,獲得了兩棵Kd LEC1轉(zhuǎn)基因新海15再生植株;分別獲得了一棵PCR鑒定正確的Kd LEC1、Gb LEC1A、Gb LEC1B轉(zhuǎn)基因新陸早33再生植株,其再生周期約為10個(gè)月。實(shí)時(shí)定量PCR分析顯示,Kd LEC1的相對表達(dá)量在2.5倍和23倍之間波動(dòng),表明p INDEX3可以在不同水平誘導(dǎo)外源基因Kd LEC1的表達(dá)。本研究旨在為LEC1在棉花體胚發(fā)生過程中的功能研究提供良好的材料,從而為棉花種質(zhì)創(chuàng)新提供理論指導(dǎo)。
【作者單位】: 石河子大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院農(nóng)業(yè)生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 新海號 新陸早號 LEC 體細(xì)胞胚胎發(fā)生 植株再生
【基金】:國家科技重大專項(xiàng)(2011ZX08005-002)資助
【分類號】:S562
【正文快照】: *通訊作者,baimingc@shzu.edu.cnThe Acquisition of Kd LEC1 and Gb LEC1 Transgenic Cotton RegenerationPlantletsZhao Zhenjun Zhang Xuejiao Cui Baiming*Laboratory of Agricultural Biotechnology in College of Life Science of Shihezi University,Shihezi,832003*Co
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2 陳金軍;植物胚胎發(fā)生調(diào)控基因LEC1的克隆及其對水稻的遺傳轉(zhuǎn)化[D];湖南農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年
,本文編號:634421
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