本文關(guān)鍵詞：靶向熱休克蛋白-27基因沉默對5-氟尿嘧啶誘導(dǎo)SW480細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制

  更多相關(guān)文章： 結(jié)直腸腫瘤 熱休克蛋白- RNA干擾 -氟尿嘧啶 細(xì)胞凋亡

【摘要】：目的:通過RNA干擾抑制熱休克蛋白-27(HSP27)基因的表達(dá),探討沉默該基因?qū)?-氟尿嘧啶(5-FU)誘導(dǎo)大腸癌SW480細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制。方法:將細(xì)胞分為正常對照組(Normal組)、陰性si RNA轉(zhuǎn)染組(NC組)、HSP27-siRNA轉(zhuǎn)染組(siRNA組)、單純5-FU組(5-FU組)、5-FU+陰性siRNA轉(zhuǎn)染組(NC+5-FU組)、5-FU+HSP27-siRNA轉(zhuǎn)染組(si RNA+5-FU組),通過脂質(zhì)體LipofectamineTM 2000將HSP27-siRNA導(dǎo)入SW480細(xì)胞,CCK-8法檢測靶向HSP27的siRNA和5-FU對SW480細(xì)胞增殖的抑制作用,流式細(xì)胞技術(shù)觀察轉(zhuǎn)染后細(xì)胞在5-FU作用下的早期凋亡情況,Western blot方法檢測凋亡相關(guān)蛋白Active-casepase-3、Active-caspase-9及細(xì)胞色素C(Cytc)的表達(dá)。結(jié)果:CCK-8法檢測結(jié)果顯示siRNA+5-FU組細(xì)胞增殖抑制率明顯高于同期siRNA組和5-FU組,表明聯(lián)合應(yīng)用抑制率明顯升高(P0.05)。流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果表明siRNA組和5-FU組均可誘導(dǎo)SW480細(xì)胞凋亡,兩者聯(lián)合應(yīng)用細(xì)胞早期凋亡率明顯升高,與Normal組及NC組比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P0.05);Western blot檢測結(jié)果顯示siRNA+5-FU組Active-casepase-3、Active-caspase-9、Cytc蛋白相對表達(dá)水平均高于siRNA組和5-FU組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P0.05)。結(jié)論:靶向HSP27-siRNA能有效抑制大腸癌SW480細(xì)胞HSP27蛋白的表達(dá),上調(diào)Active-casepase-3、Active-caspase-9、Cytc蛋白的表達(dá),增強(qiáng)5-FU誘導(dǎo)SW480細(xì)胞凋亡,逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞對5-FU的耐藥。
【作者單位】： 溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院肛腸外科;
【關(guān)鍵詞】： 結(jié)直腸腫瘤 熱休克蛋白- RNA干擾 -氟尿嘧啶 細(xì)胞凋亡
【分類號】：R735.34
【正文快照】： 2016-05-04近年來,大腸癌發(fā)病率和病死率不斷攀升,已經(jīng)嚴(yán)重威脅了人類的健康。對于中晚期患者,指南上推薦以5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)為基礎(chǔ)的輔助化療可提高部分患者的生存期,然而腫瘤細(xì)胞耐藥是化療失敗并導(dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā)的原因之一。目前大量研究表明許多因素可影響5-F

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本文編號：621965