發(fā)布時(shí)間：2024-06-29 14:16

　　目的應(yīng)用基因芯片技術(shù)篩選曲古菌素A(TSA)處理順鉑耐藥肺癌細(xì)胞株A549/CDDP后的凋亡相關(guān)基因的表達(dá)變化,篩選TSA治療順鉑耐藥肺癌的靶分子。方法 TSA處理A549/CDDP細(xì)胞24h,以未經(jīng)TSA處理的A549/CDDP細(xì)胞作為對(duì)照組,提取兩組細(xì)胞總RNA并反轉(zhuǎn)錄為c DNA,采用Nimble Gen全基因組表達(dá)芯片檢測(cè)基因表達(dá)情況,以Nimble Scan 2.5軟件結(jié)合GO分析比較TSA處理組與對(duì)照組基因表達(dá)譜的變化,從差異表達(dá)基因中篩選出與凋亡和增殖相關(guān)的基因。結(jié)果與對(duì)照組相比,共篩選到TSA上調(diào)的凋亡相關(guān)基因85個(gè)以及下調(diào)的細(xì)胞增殖和生長(zhǎng)相關(guān)基因43個(gè)。GO分析發(fā)現(xiàn),這些基因的分子功能主要是調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞對(duì)化學(xué)刺激的抵抗作用,以及參與細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、細(xì)胞生物質(zhì)量維持等生物過(guò)程。TSA不僅激活了線粒體凋亡通路,而且激活了死亡受體相關(guān)凋亡通路,下調(diào)了與細(xì)胞耐藥相關(guān)的基因BAG3和ABCC2。結(jié)論 TSA改變了A549/CDDP細(xì)胞中凋亡和增殖基因的表達(dá),這些基因可能在TSA治療順鉑耐藥肺癌中發(fā)揮了重要作用。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料和試劑
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與處理
        1.2.2 總RNA的提取和反轉(zhuǎn)錄
        1.2.3 基因芯片雜交
        1.2.4 實(shí)時(shí)定量PCR驗(yàn)證
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 熒光染色檢測(cè)TSA誘導(dǎo)凋亡結(jié)果
    2.2 總RNA抽提結(jié)果
    2.3芯片檢測(cè)結(jié)果
    2.4 實(shí)時(shí)定量PCR驗(yàn)證
    2.5 GO富集分析結(jié)果
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