天堂国产午夜亚洲专区-少妇人妻综合久久蜜臀-国产成人户外露出视频在线-国产91传媒一区二区三区

當前位置:主頁 > 科技論文 > 基因論文 >

漢坦病毒Hunan03株S基因克

發(fā)布時間:2017-08-02 20:31

  本文關(guān)鍵詞:漢坦病毒Hunan03株S基因克隆、表達及核蛋白免疫原性分析


  更多相關(guān)文章: 漢坦病毒 S基因 原核表達 核蛋白免疫原性


【摘要】:目的構(gòu)建漢坦病毒Hunan03株核蛋白基因原核重組表達載體,在大腸桿菌中進行核蛋白表達,研究核蛋白的免疫性及免疫反應性。方法設計特異性擴增漢坦病毒Hunan03株S基因完整開放閱讀框(ORF)的引物,RT-PCR擴增,產(chǎn)物克隆到pGM-T載體,轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞TOP10,應用藍白斑篩選、酶切、PCR鑒定,定向克隆到pGEX-6p-2原核表達載體,轉(zhuǎn)化Ecoli.BL21StarTM(DE3),IPTG誘導表達,SDS-PAGE、Western blot對重組蛋白進行鑒定。應用Glutathione Sepharose 4B純化柱純化重組蛋白,免疫新西蘭兔,建立間接ELISA法對核蛋白的免疫原性與免疫反應性進行評價。結(jié)果 PCR擴增S基因ORF區(qū)域產(chǎn)物大小約1 306bp,重組載體pGEX-6p-2-S經(jīng)雙酶切、PCR、測序鑒定提示構(gòu)建成功;在37℃,IPTG濃度為0.8mmol/L誘導5h的條件下,表達出最高量的相對分子量約74kDa的GST-NP融合蛋白。建立的間接ELISA法檢測GST-NP融合蛋白免疫后的新西蘭兔血清,IgM抗體滴度達1∶8 000,IgG抗體滴度達1∶16 000。結(jié)論成功構(gòu)建了高效表達的漢坦病毒S基因重組表達載體,獲得了純度較高具有較好的免疫原性與免疫反應性的核蛋白,為后續(xù)漢坦病毒單克隆抗體的制備奠定了基礎。
【作者單位】: 湖南省疾病預防控制中心 湖南省微生物分子生物學重點實驗室;中南大學基礎醫(yī)學院;
【關(guān)鍵詞】漢坦病毒 S基因 原核表達 核蛋白免疫原性
【基金】:湖南省科技廳科研基金(No.2013TT2016)資助~~
【分類號】:R373
【正文快照】: 湖南省科技廳科研基金(No.2013TT2016)資助(1.Hunan Provincial Center for Disease Control and Prevention,the Key Laboratory of Microbial Molecular Biology of Hunan Province,Changsha410005,China;2.School of Basic Medical Science,Central South University,Chang,

本文編號:611121

資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://sikaile.net/kejilunwen/jiyingongcheng/611121.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權(quán)申明:資料由用戶55001***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要刪除請E-mail郵箱bigeng88@qq.com
内用黄老外示儒术出处| 99久久人妻中文字幕| 偷拍偷窥女厕一区二区视频| 日本精品中文字幕人妻| 久久一区内射污污内射亚洲| 伊人网免费在线观看高清版 | 自拍偷拍一区二区三区| 麻豆视传媒短视频免费观看| 午夜精品在线观看视频午夜| 爱草草在线观看免费视频| 久七久精品视频黄色的| 老富婆找帅哥按摩抠逼视频| 日韩一区二区三区18| 99精品国产自在现线观看| 日韩中文字幕在线不卡一区| 日韩一区二区三区高清在| 亚洲国产四季欧美一区| 亚洲高清中文字幕一区二三区| 日韩av亚洲一区二区三区| 亚洲成人免费天堂诱惑| 日本免费一区二区三女| 国产熟女高清一区二区| 在线免费观看一二区视频| 91精品国产综合久久不卡| 欧美一区日韩一区日韩一区| 日韩欧美综合中文字幕 | 97精品人妻一区二区三区麻豆| 日韩1区二区三区麻豆| 熟女少妇一区二区三区蜜桃| 亚洲精品国产主播一区| 免费精品一区二区三区| 亚洲精品欧美精品一区三区| 国产成人亚洲欧美二区综| 亚洲伊人久久精品国产| 亚洲中文在线男人的天堂| 伊人欧美一区二区三区| 嫩呦国产一区二区三区av| 日韩精品一级片免费看| 天堂网中文字幕在线观看| 国产免费自拍黄片免费看| 青青操视频在线观看国产|