本文關(guān)鍵詞：溫度、鹽度變化及鰻弧菌刺激對(duì)菲律賓蛤仔Ⅰ型溶菌酶基因表達(dá)的影響

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【摘要】：為研究在環(huán)境因素變化后,菲律賓蛤仔I型溶菌酶參與免疫應(yīng)答反應(yīng)的變化模式,實(shí)驗(yàn)采用c DNA末端快速擴(kuò)增技術(shù),從菲律賓蛤仔體內(nèi)克隆獲得了一種I型溶菌酶基因的全長c DNA序列(命名為Rpi LYZ-2),該序列開放閱讀框(ORF)為471 bp,編碼156個(gè)氨基酸。Rpi LYZ-2基因在所檢測(cè)組織中均有表達(dá),其中在外套膜中表達(dá)量最高,在肌肉組織中表達(dá)量最低。采用熒光定量PCR法,研究了不同溫度[(29±1)、(21±1)和(13±1)°C]、鹽度(32、22和12)及鰻弧菌刺激對(duì)菲律賓蛤仔I型溶菌酶基因表達(dá)的影響。結(jié)果顯示,在溫度21°C和鹽度22脅迫處理后,Rpi LYZ-1基因的表達(dá)量呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì),而Rpi LYZ-2基因的表達(dá)量則呈現(xiàn)先下降后上升的趨勢(shì)。在高溫29°C和低鹽12脅迫條件下,Rpi LYZ-1基因表達(dá)量總體呈下降趨勢(shì),而Rpi LYZ-2基因表達(dá)量總體呈上升趨勢(shì);經(jīng)鰻弧菌刺激后,Rpi LYZ-1基因的表達(dá)量得到顯著誘導(dǎo),而Rpi LYZ-2基因表達(dá)量則表現(xiàn)為先降低后上升的趨勢(shì)。研究表明,環(huán)境因子變化和病原菌刺激能夠顯著影響菲律賓蛤仔兩種I型溶菌酶基因的表達(dá)量,且Rpi LYZ-1和Rpi LYZ-2可能存在著功能分化。
【作者單位】： 寧波大學(xué)海洋學(xué)院;浙江海洋高效健康養(yǎng)殖協(xié)同創(chuàng)新中心;
【關(guān)鍵詞】： 菲律賓蛤仔 Ⅰ型溶菌酶 基因克隆 溫度 鹽度 鰻弧菌
【基金】：國家科技支撐計(jì)劃(2011BAD13B0903)~~
【分類號(hào)】：S944.47
【正文快照】： 溶菌酶(lysozyme,LYZ)是一種水解酶,又稱為1,4-β-N-乙酰胞壁質(zhì)酶。它最早由Fleming[1]在1922年發(fā)現(xiàn),主要功能是催化肽聚糖N-乙酰葡萄糖胺(NAG)和N-乙酰胞壁酸(NAM)之間β-1,4糖苷鍵的水解,從而破壞細(xì)菌細(xì)胞壁中肽聚糖骨架,導(dǎo)致細(xì)胞壁破裂、內(nèi)容物溢出而使細(xì)菌死亡。近年來的

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