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大豆GmRAV基因參與BR信號傳導途徑及重組蛋白可溶性分析

發(fā)布時間:2017-07-20 16:19

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【摘要】:對大豆東農(nóng)42噴施表油菜素內(nèi)酯(epi BL),進行GmRAV定量,研究油菜素內(nèi)酯(BR)對GmRAV基因表達的影響,同時對T5代GmRAVox煙草外源添加epi BL,研究GmRAV基因是否也參與BR信號從而抑制植物的生長發(fā)育。結(jié)果表明:BR抑制GmRAV基因表達,并且外源添加epiBL并未促進GmRAVox煙草植株莖延伸,表明GmRAV可能為BR促進植物的生長發(fā)育信號傳導途徑的負調(diào)節(jié)因子。同時,將大豆中已克隆的GmRAV基因克隆到原核表達載體p ET28a上,構(gòu)建與His標簽融合的重組蛋白pET28a-GmRAV質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)中,對其進行37℃、28℃兩種不同溫度下0.5mmol·L~(-1)IPTG誘導,誘導時間為6 h。SDS-PAGE電泳結(jié)果表明:分子量大約為40 kDa的重組蛋白在不同溫度下均表達,低溫可以明顯增強GmRAV蛋白的可溶性。
【作者單位】: 哈爾濱醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院;東北農(nóng)業(yè)大學大豆生物學教育部重點實驗室/農(nóng)業(yè)部東北大豆生物學與遺傳育種重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】大豆 BR GmRAV蛋白 原核表達 可溶性分析
【基金】:黑龍江省教育廳面上項目(12541465)
【分類號】:S565.1
【正文快照】: 油菜素內(nèi)酯(BR)在植物多個發(fā)育過程中起著非常重要的作用,參與BR生物合成突變體det2或BR信號缺陷突變體bri1均表現(xiàn)為矮化、葉色暗綠、葉片上卷、育性降低、發(fā)育延遲等性狀[1]。外源BR可以部分或者完全恢復BR合成缺陷型突變體的表型。研究前期發(fā)現(xiàn)RAV轉(zhuǎn)錄因子是短日照植物和長

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5 郝明強;表達HPV6型L2△E7E6重組蛋白的工程菌株構(gòu)建及免疫效果評價[D];中國疾病預防控制中心;2012年

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