發(fā)布時間：2017-07-18 05:05

  本文關(guān)鍵詞：減毒李斯特菌載體運送HPV16 E7基因重組疫苗的構(gòu)建及其生物學(xué)特性

  更多相關(guān)文章： 減毒單核細(xì)胞增生李斯特菌 人乳頭瘤狀病毒型E蛋白 巨噬細(xì)胞系 安全性

【摘要】：單核細(xì)胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一種理想的腫瘤疫苗載體,本文旨在構(gòu)建表達(dá)人乳頭瘤狀病毒(HPV)16型E7蛋白的減毒重組李斯特菌疫苗候選株并分析其生物學(xué)特性。利用同源重組技術(shù)將HPV16 E7基因定點整合至LMhly基因信號肽序列下游,獲得減毒重組李斯特菌LM4△hly::E7,并對該重組菌進(jìn)行生物學(xué)特性研究。實驗結(jié)果表明,重組菌能夠分泌表達(dá)具有免疫學(xué)活性的E7-LLO融合蛋白,大小約66 k Da;通過激光共聚焦掃描顯微鏡觀察到重組菌能夠在RAW264.7細(xì)胞胞內(nèi)增殖。ELISA測定結(jié)果顯示減毒重組菌能夠誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生E7特異性抗體。重組菌在C57BL/6小鼠中LD50為3.863×10~9 CFU,低于親本株4個數(shù)量級,通過組織切片觀察到重組菌對小鼠肝臟及脾臟無明顯病理變化。以上表明,本研究構(gòu)建的分泌表達(dá)E7-LLO融合蛋白的減毒重組李斯特菌具有較好的安全性,為下一步研究其抗腫瘤作用提供了材料,并為研發(fā)宮頸癌的免疫治療型候選疫苗奠定重要基礎(chǔ)。
【作者單位】： 揚州大學(xué)江蘇省人獸共患病重點實驗室江蘇省動物重要疫病和人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【關(guān)鍵詞】： 減毒單核細(xì)胞增生李斯特菌 人乳頭瘤狀病毒型E蛋白 巨噬細(xì)胞系 安全性
【基金】：國家自然科學(xué)基金(Nos.31472193,31101841) 江蘇高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程項目資助~~
【分類號】：R730.51
【正文快照】： Received:September 29,2015;Accepted:December 21,2015Supported by:National Natural Science Foundation of China(Nos.31472193,31101841),Priority Academic Program Development ofJiangsu Higher Education Institutions.Corresponding author:Xin′an Jiao.Tel:+86-5

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 蘇燕;冷凍品須防李斯特菌[J];中國檢驗檢疫;2003年08期

2 胡桂華,安靜,欒穎,宋春利,李艷艷;沈陽地區(qū)食源性李斯特菌帶染研究[J];職業(yè)與健康;2003年02期

3 田霞,李遠(yuǎn)釗,張培正;李斯特菌的污染現(xiàn)狀及控制措施[J];現(xiàn)代食品科技;2005年01期

4 朱龍有;李卓;安東;;李斯特菌肺炎1例報告[J];中國實用醫(yī)藥;2012年26期

5 陳健舜;朱凝瑜;孔蕾;何中央;方維煥;;李斯特菌多重PCR檢測方法的建立[J];中國漁業(yè)質(zhì)量與標(biāo)準(zhǔn);2013年01期

6 陳寧慶;李斯特菌是怎么回事[J];家庭醫(yī)學(xué);2000年06期

7 陳太基,封幼玲,戴建華,陳華;167種食品中的李斯特菌檢驗[J];衛(wèi)生研究;2000年04期

8 陳敏,王穎,顧其芳,李潔;食品中李斯特菌快速檢測方法的建立與研究[J];中國衛(wèi)生檢驗雜志;2001年03期

9 李干紅,丁曉雯;李斯特菌及其快速檢測[J];廣州食品工業(yè)科技;2002年03期

10 李小春,陳慧燕,李毅,金茜,章樂怡;速凍食品中李斯特菌檢測方法探討與結(jié)果分析[J];中國衛(wèi)生檢驗雜志;2004年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 馬保華;張輝華;呂平;曹永長;畢英佐;;李斯特菌套式PCR快速檢測方法的建立及初步應(yīng)用[A];全國人畜共患病學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2006年

2 李郁;魏建忠;王桂軍;;李斯特菌與食品安全[A];食品安全的理論與實踐——安徽食品安全博士科技論壇論文集[C];2005年

3 劉晶;;10例孕產(chǎn)婦感染李斯特菌的特點及藥敏分析[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國中青年檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2012年

4 王芳;于力;;李斯特菌研究進(jìn)展[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會動物傳染病學(xué)分會第十二次人獸共患病學(xué)術(shù)研討會暨第六屆第十四次教學(xué)專業(yè)委員會論文集[C];2012年

5 楊世萍;李靜;;1例產(chǎn)婦感染李斯特菌報道[A];全國婦產(chǎn)科護(hù)理學(xué)術(shù)交流暨專題講座會議論文匯編[C];2007年

6 王紅;陳燕梅;張正東;;2005-2007年自貢市食品中單核細(xì)胞增生李斯特菌污染狀況的調(diào)查[A];“環(huán)境與健康”學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2007年

7 王怡凈;;李斯特菌引起的食物中毒及其防治[A];四川省營養(yǎng)學(xué)會2002年學(xué)術(shù)會議專題報告及論文摘要匯編[C];2002年

8 朱敏麗;林振浪;;新生兒李斯特菌敗血癥2例[A];2009年浙江省圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會暨“圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)熱點問題”專題學(xué)術(shù)論壇論文匯編[C];2009年

9 吳旭琴;;G12-type對M3乙酰膽堿受體介導(dǎo)的PLD調(diào)控研究[A];中華醫(yī)院管理學(xué)會第十一屆全國醫(yī)院感染管理學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2004年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馮衛(wèi)東;加推動李斯特菌基因組序列研究[N];科技日報;2013年

2 林曉麗;廣州鱸魚檢測項目尚不包含李斯特菌[N];廣州日報;2007年

3 中國疾病預(yù)防控制中心研究員 葉長蕓;冰箱殺手李斯特菌[N];北京日報;2009年

4 葉圣琳;李斯特菌來勢猛,英國老年人“中招”多[N];新華每日電訊;2009年

5 杜鵑;美國:香瓜染李斯特菌,死十余人[N];新華每日電訊;2011年

6 本報記者 聶國春;專家：警惕冰箱里的殺手[N];中國消費者報;2011年

7 陳繼培;慎防“李斯特病”[N];廣東科技報;2000年

8 陳倩;食品真空包裝并非萬無一失[N];健康報;2007年

9 顧皓行;澳研究使用噬菌體降低李斯特菌污染風(fēng)險[N];中國食品報;2011年

10 本版編輯　趙志剛 　楊帆　陳誠;多國水產(chǎn)品遭遇病菌侵襲[N];中國漁業(yè)報;2007年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 陳健舜;單核細(xì)胞增多性李斯特菌分子進(jìn)化與酸應(yīng)激功能基因組學(xué)研究[D];浙江大學(xué);2010年

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1 王毅;建立鑒定李斯特菌種及亞型的多重PCR方法及用于李斯特菌核酸檢測的新型恒溫擴增技術(shù)[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2015年

2 武曉林;單核細(xì)胞增多性李斯特菌溶血素LLO的功能關(guān)鍵位點鑒定及表面展示系統(tǒng)的構(gòu)建[D];浙江農(nóng)林大學(xué);2015年

3 李帥;李斯特菌侵染宿主細(xì)胞胞內(nèi)磷脂酶D活性變化的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2009年

4 張晨菊;三株致病性李斯特菌的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];揚州大學(xué);2010年

5 張曉峰;李斯特菌分子鑒定與分型及其在安全牛奶生產(chǎn)中的應(yīng)用[D];浙江大學(xué);2002年

6 駱笑凱;單核細(xì)胞增多性李斯特菌檢測試劑盒優(yōu)化及其表面蛋白的免疫反應(yīng)性分析[D];浙江大學(xué);2009年

7 田國明;食源性單核細(xì)胞增多性李斯特菌：肽核酸原位熒光檢測與LMO1847蛋白免疫原性分析[D];浙江大學(xué);2007年

8 黃麗;單核細(xì)胞增多性李斯特菌Lmo0964蛋白功能研究[D];浙江農(nóng)林大學(xué);2014年

9 趙智慧;新生兒李斯特菌敗血癥20例臨床特征分析[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2014年

10 楊雨;一種針對肝癌干細(xì)胞的新型李斯特菌疫苗[D];南京醫(yī)科大學(xué);2014年

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本文編號：556080