轉(zhuǎn)異源chi基因的Bt工程菌株的生防潛力評(píng)價(jià)
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更多相關(guān)文章: 蘇云金芽胞桿菌 幾丁質(zhì)酶 組成型表達(dá) 廣譜抑真菌 辣椒疫霉
【摘要】:【目的】構(gòu)建增強(qiáng)抑制真菌能力兼殺蟲的蘇云金芽胞桿菌多功能生防菌株!痉椒ā繉⒑薪M成型高效表達(dá)啟動(dòng)子、地衣芽胞桿菌chi MY基因的重組質(zhì)粒p DM,轉(zhuǎn)化進(jìn)殺蟲活性高且有一定抑菌活性的Bt519-1菌株。酶譜分析方法確認(rèn)Bt519(p DM)組成型異源表達(dá)幾丁質(zhì)酶。室內(nèi)測(cè)定工程菌株抑菌譜,計(jì)算抑菌效率,確定最敏感的植物病原真菌,進(jìn)行植物盆栽病害防治的應(yīng)用潛力評(píng)價(jià)。將不同濃度的Bt粗酶液灌入甜椒幼苗根部,12 h后接種辣椒疫霉孢子液,接種2 d后開始觀察,記錄發(fā)病株數(shù)。自7 d起調(diào)查植株發(fā)病情況統(tǒng)計(jì)并分析防治效果。【結(jié)果】SDS-PAGE及酶譜分析證明,Bt519(p DM)能夠特異表達(dá)68 k D蛋白,該蛋白為異源幾丁質(zhì)酶Chi MY。抑菌譜測(cè)定證明,工程菌抑制效率達(dá)到90%以上的有5種真菌,其中最明顯的是辣椒疫霉。盆栽實(shí)驗(yàn)證明,Bt519(p DM)7 d的防效為73.2%。工程菌株對(duì)棉鈴蟲的半致死濃度(LC50)為121.26 mg/L!窘Y(jié)論】Bt519(p DM)是一株有應(yīng)用潛力的生防菌株。
【作者單位】: 南開大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院微生物學(xué)系;南開大學(xué)分子微生物學(xué)與技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;南開大學(xué)農(nóng)藥國家工程研究中心;
【關(guān)鍵詞】: 蘇云金芽胞桿菌 幾丁質(zhì)酶 組成型表達(dá) 廣譜抑真菌 辣椒疫霉
【基金】:國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.31371979) 教育部博士點(diǎn)基金項(xiàng)目(No.20120031110019) 天津市自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.12JCYBJC198000)~~
【分類號(hào)】:S476;Q78
【正文快照】: 對(duì)蘇云金芽胞桿菌(Bacillus thuringiensis,Bt)的研究歷史已超過100年。目前上百種Bt商品制劑在世界各地登記注冊(cè),成功用于多種農(nóng)、林、果蔬和衛(wèi)生害蟲的防治[1-2]。為了加速昆蟲的罹病進(jìn)程、提高死亡率,近年來學(xué)者開始關(guān)注幾丁質(zhì)酶對(duì)Bt的增效作用。昆蟲中腸圍食膜的主要結(jié)構(gòu)
【參考文獻(xiàn)】
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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】
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【相似文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):547624
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