本文關(guān)鍵詞：家蠶BmBrat基因的克隆與鑒定

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【摘要】：NHL家族蛋白具有調(diào)控細(xì)胞增殖與分化的功能,在哺育動(dòng)物中被廣泛研究。本文克隆得到家蠶NHL蛋白家族成員BmBrat基因,通過RACE技術(shù)獲得該基因cDNA全長序列為3 614 bp,其ORF為2 580 bp,編碼859個(gè)氨基酸,預(yù)測其蛋白分子量為94.3 kDa,等電點(diǎn)為6.65。利用RT-PCR技術(shù)檢測其在五齡3 d家蠶各組織表達(dá)情況,結(jié)果表明其在幼蟲各組織均有表達(dá),包括絲腺、中腸、脂肪體、馬氏管等,且卵巢和頭部表達(dá)量最高;胚胎時(shí)期表達(dá)譜分析顯示其在胚胎發(fā)育第4天和第5天有高量表達(dá)。經(jīng)原核表達(dá)、蛋白純化及免疫小鼠后獲得家蠶BmBrat多克隆抗體,且Western blotting及免疫熒光檢測顯示該抗體可以特異檢測家蠶BmBrat蛋白;免疫熒光結(jié)果表明BmBrat蛋白定位于家蠶血細(xì)胞胞質(zhì)中,為進(jìn)一步研究BmBrat基因的生物學(xué)功能奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 西南大學(xué)家蠶基因組生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 家蠶 BmBrat基因 表達(dá)譜 抗體制備 亞細(xì)胞定位
【基金】：國家自然科學(xué)基金(No.81201551) 高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金(No.20130182110003) 重慶市科委自然科學(xué)院士基金(No.CSTC2013jcyjys0007) 中央高�；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金(Nos.XDJK2013B020,SWU111014)資助~~
【分類號(hào)】：Q78
【正文快照】： NHL家族的名字源于發(fā)現(xiàn)的3 個(gè)成員:NCL-1、HT2A和LIN-41,這3 個(gè)因子與RNA代謝有關(guān)系,可能參與轉(zhuǎn)錄后基因的表達(dá)調(diào)控[1]。研究表明,NHL家族的成員均含有3 個(gè)保守的基序:1 個(gè)RING、1 個(gè)或是2 個(gè)B-box和1 個(gè)coiled-coil [2]。在調(diào)節(jié)Brat (Brain tumor) 蛋白的活性中NHL結(jié)構(gòu)起了至

【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號(hào)：543468