本文關鍵詞：對小鼠胚胎母型—合子型（MET）過渡時期抗氧化酶基因變化規(guī)律的研究

  更多相關文章： 小鼠 早期胚胎 活性氧 抗氧化酶基因 過氧化物酶體 母型-合子型過渡

【摘要】：本實驗以小鼠早期胚胎為試驗材料,檢測小鼠早期胚胎內(nèi)部活性氧水平、抗氧化酶基因的表達量及過氧化物酶體膜蛋白-20(PMP-20)基因的表達量,揭示小鼠胚胎MET發(fā)育階段過氧化物酶體的變化規(guī)律。同時檢測活性氧(以H2O2為例)對這一時期胚胎內(nèi)抗氧化酶基因表達量和過氧化物酶體數(shù)量變化的影響,為詮釋哺乳動物早期胚胎抗氧化提供新的事實及理論依據(jù)。通過本實驗得到以下實驗結(jié)果：1、分別用濃度為0、10-5%、10-7%、10-9%的H2O2處理的小鼠胚胎,確定對小鼠胚胎體外發(fā)育有效H2O2濃度選擇為10-7%;2、體內(nèi)處理組,4-cell胚胎內(nèi)活性氧含量顯著高于2-cell早期和晚期,且2-cell早期和晚期胚胎內(nèi)活性氧含量無顯著性差異;體外處理組和H2O2處理組,均是2-cell晚期胚胎內(nèi)活性氧含量顯著高于2-cell早期和4-cell期,且2-cell早期與4-cell期胚胎內(nèi)活性氧含量無顯著性差異。處于同一時期的胚胎,2-cell早期和晚期,體外組胚胎內(nèi)活性氧含量顯著高于體內(nèi)組,4-cell期胚胎內(nèi)活性氧含量沒有顯著性差異；3、無論早期胚胎是否用H2O2處理,CAT、Mn-SOD、GPX-1、GPX-4、PMP-20基因均在4-cell胚胎的表達量高于2-cell早期胚胎和晚期胚胎,但CAT基因在2-cell胚胎內(nèi)未表達,Mn-SOD、GPX-1、PMP-20基因在2-cell胚胎早期的表達量均高于2-cell晚期,GPX-4基因在2-cell早期胚胎和晚期胚胎的表達量并沒有什么區(qū)別；而Cu/Zn-SOD基因在4-cell胚胎內(nèi)表達量顯著低于2-cell早期胚胎和晚期胚胎,但體外處理組2-cell早期胚胎內(nèi)Cu/Zn-SOD基因表達量顯著高于2-cell晚期,而H2O2處理組則相反；4、處于同一時期的胚胎,Mn-SOD、GPX-1、PMP-20基因的表達量均是H2O2處理組高于體外處理組；CAT、GPX-4基因的表達量只有在4-cell時期時,H2O2處理組高于體外處理組;Cu/Zn-SOD基因的表達量只有在2-cell早期,體外處理組顯著高于H2O2,處理組。結(jié)論：不同抗氧化酶基因在2-cell到4-cell發(fā)育階段的表達均有所不同,PMP-20基因在2-cell晚期表達量達到低谷,間接說明這一時期過氧化物酶體含量最少。
【關鍵詞】：小鼠 早期胚胎 活性氧 抗氧化酶基因 過氧化物酶體 母型-合子型過渡
【學位授予單位】：延邊大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：Q954.4
【目錄】：

• 摘要6-7
• Abstract7-10
• 第一章 前言10-22
• 1.1 活性氧和自由基簡介10-12
• 1.2 活性氧對胚胎發(fā)育的影響12-14
• 1.2.1 DNA12-13
• 1.2.2 蛋白質(zhì)13
• 1.2.3 脂質(zhì)13
• 1.2.4 活性氧與胚胎發(fā)育阻滯的關系13-14
• 1.3 哺乳動物的MET時期14-15
• 1.4 細胞內(nèi)抗氧化物質(zhì)15-19
• 1.4.1 超氧化物歧化酶(SOD)15-16
• 1.4.2 谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)16-18
• 1.4.3 過氧化氫酶(CAT)18-19
• 1.4.4 非酶類抗氧化劑19
• 1.5 胚胎抗氧化機制19-20
• 1.6 過氧化物酶體在早期胚胎發(fā)育中的抗氧化作用20
• 1.7 過氧化物媒體膜蛋白-20(PMP-20)研究進展20-21
• 1.8 本實驗的目的及意義21-22
• 第二章 材料與方法22-33
• 2.1 試驗材料與儀器22-24
• 2.1.1 試驗時間及地點22
• 2.1.2 試驗材料22
• 2.1.3 試驗主要儀器22-23
• 2.1.4 試驗主要藥品23-24
• 2.2 主要試驗藥品配制及試驗方法24-33
• 2.2.1 試驗藥品的配制24-28
• 2.2.2 試驗方法28-33
• 第三章 結(jié)果與分析33-40
• 3.1 H_2O_2處理小鼠胚胎氧化損傷模型的建立33
• 3.2 小鼠MET時期胚胎內(nèi)ROS含量的變化33-35
• 3.2.1 各處理組胚胎內(nèi)ROS水平熒光圖像及量化結(jié)果34
• 3.2.2 相同發(fā)育階段體內(nèi)、體外胚胎內(nèi)活性氧水平的比較34-35
• 3.3 小鼠MET時期胚胎內(nèi)抗氧化酶基因的表達35-39
• 3.3.1 小鼠胚胎內(nèi)CAT基因的表達及量化分析35
• 3.3.2 小鼠胚胎內(nèi)Cu/Zn-SOD和Mn-SOD基因的表達及量化分析35-37
• 3.3.3 小鼠胚胎內(nèi)GPX-1和GPX-4基因的表達及量化分析37-39
• 3.4 小鼠MET時期胚胎內(nèi)PMP-20基因的表達及量化分析39-40
• 第四章 討論40-43
• 第五章 結(jié)論43-44
• 參考文獻44-55
• 致謝55-56

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本文編號：543072