本文關(guān)鍵詞：馬氏珠母貝PmCOLVIA6基因的克隆和表達(dá)分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：collagenⅥ(COLⅥ)是膠原蛋白家族的重要成員,廣泛分布于動(dòng)物體細(xì)胞外基質(zhì),在脊椎動(dòng)物骨骼形成過(guò)程中發(fā)揮重要作用。為了探究COLⅥ在馬氏珠母貝貝殼形成中的作用,本研究運(yùn)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)和c DNA末端快速擴(kuò)增技術(shù)(RACE)獲得了馬氏珠母貝Pm COLVIA6基因的全長(zhǎng)序列,克隆獲得其啟動(dòng)子區(qū)域,并對(duì)其蛋白結(jié)構(gòu)進(jìn)行了分析。熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)了該基因在馬氏珠母貝各個(gè)組織的表達(dá)量分布,并利用原位雜交技術(shù)檢測(cè)Pm COLVIA6基因在外套膜的表達(dá)定位。結(jié)果表明:Pm COLVIA6序列全長(zhǎng)為2 100 bp,開(kāi)放閱讀框(ORF)長(zhǎng)為1 875 bp,編碼624個(gè)氨基酸,5'非翻譯區(qū)(5'UTR)長(zhǎng)56 bp,3'非翻譯區(qū)(3'UTR)長(zhǎng)169 bp,于5'調(diào)控區(qū)克隆得到長(zhǎng)為1 826 bp的序列,可能存在4個(gè)啟動(dòng)子序列。Pm COLVIA6蛋白含有典型的v WA結(jié)構(gòu)域,但三股螺旋結(jié)構(gòu)缺失。熒光定量分析表明Pm COLVIA6基因在馬氏珠母貝的各個(gè)組織均有表達(dá),而在珍珠囊和外套膜中央?yún)^(qū)的表達(dá)量顯著高于其它組織。原位雜交結(jié)果顯示Pm COLVIA6的m RNA主要分布于外套膜中央?yún)^(qū)的外表皮細(xì)胞。綜上所述,Pm COLVIA6可能參與馬氏珠母貝珍珠層的形成。
【作者單位】： 廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 馬氏珠母貝 COLⅥ 表達(dá)分析 原位雜交
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31272635;31372526)資助
【分類號(hào)】：S917.4
【正文快照】： Cloning and Expression Analysis of Pm COLVIA6 Gene of Pinctada martensiiLiang Jinlian Zheng Zhe Huang Ronglian Wang Qingheng Deng Yuewen Jiao Yu Du Xiaodong*Fisheries College,Guangdong Ocean University,Zhanjiang,524025*Corresponding author,gdhddxd@hotmai

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本文編號(hào)：487112