本文關鍵詞：水稻轉基因系CX8621中Xa21的整合和表達，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：農桿菌介導的轉基因技術在植物中已被廣泛應用,而目的基因能否發(fā)揮功能受到多種因素的影響。前期,通過農桿菌介導的轉化,實驗室創(chuàng)制了無選擇標記、無載體骨架殘留的水稻轉Xa21基因系CX8621。截止目前,CX8621已穩(wěn)定遺傳16代,依然保持著對水稻白葉枯病的優(yōu)良抗性。在此基礎上,本研究對外源基因Xa21在CX8621中的整合和表達情況進行了分析。首先,通過在轉化載體p BXa21的左右邊界與Xa21基因序列設計嵌套引物,確定Xa21被完整地整合到CX8621中。隨后,利用改良的Tail-PCR方法體外克隆了整合位點的邊界序列,明確了Xa21被整合在CX8621的2號染色體上。然后,通過RT-PCR分析了Xa21在CX8621中不同時期和不同組織的表達情況,結果表明Xa21在CX8621中能穩(wěn)定表達,其表達量的變化與之前報道的抗病性反應吻合。此外,還制備了天然XA21蛋白的抗體,對CX8621不同時期、不同組織中XA21蛋白的表達量進行了檢測,結果發(fā)現(xiàn)在種子中檢測不到XA21蛋白。由此,通過對外源基因Xa21的整合和表達分析,為CX8621的轉基因生物安全評價提供了部分科學依據。
【作者單位】： 中國科學院遺傳與發(fā)育生物學研究所;江漢大學系統(tǒng)生物學研究院;河北農業(yè)大學生命科學學院;
【關鍵詞】： 轉基因水稻 Xa 抗白葉枯病 T-DNA整合 表達分析
【基金】：轉基因生物新品種培育重大專項(No.2014ZX08001-002) 國家自然科學基金(No.31300999) 江漢大學科研啟動項目(No.3003-06000043)資助~~
【分類號】：S511;Q943.2
【正文快照】： Received:December 24,2015;Accepted:January 28,2016Supported by:National Transgenic Major Program of China(No.2014ZX08001-002),National Natural Science Foundation of China(No.31300999),Internal Grant of Jianhan University(No.3003-06000043).Corresponding a

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本文編號：479491