本文關(guān)鍵詞：水稻轉(zhuǎn)基因系CX8621中Xa21的整合和表達(dá)，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因技術(shù)在植物中已被廣泛應(yīng)用,而目的基因能否發(fā)揮功能受到多種因素的影響。前期,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化,實(shí)驗(yàn)室創(chuàng)制了無選擇標(biāo)記、無載體骨架殘留的水稻轉(zhuǎn)Xa21基因系CX8621。截止目前,CX8621已穩(wěn)定遺傳16代,依然保持著對(duì)水稻白葉枯病的優(yōu)良抗性。在此基礎(chǔ)上,本研究對(duì)外源基因Xa21在CX8621中的整合和表達(dá)情況進(jìn)行了分析。首先,通過在轉(zhuǎn)化載體p BXa21的左右邊界與Xa21基因序列設(shè)計(jì)嵌套引物,確定Xa21被完整地整合到CX8621中。隨后,利用改良的Tail-PCR方法體外克隆了整合位點(diǎn)的邊界序列,明確了Xa21被整合在CX8621的2號(hào)染色體上。然后,通過RT-PCR分析了Xa21在CX8621中不同時(shí)期和不同組織的表達(dá)情況,結(jié)果表明Xa21在CX8621中能穩(wěn)定表達(dá),其表達(dá)量的變化與之前報(bào)道的抗病性反應(yīng)吻合。此外,還制備了天然XA21蛋白的抗體,對(duì)CX8621不同時(shí)期、不同組織中XA21蛋白的表達(dá)量進(jìn)行了檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn)在種子中檢測(cè)不到XA21蛋白。由此,通過對(duì)外源基因Xa21的整合和表達(dá)分析,為CX8621的轉(zhuǎn)基因生物安全評(píng)價(jià)提供了部分科學(xué)依據(jù)。
【作者單位】： 中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所;江漢大學(xué)系統(tǒng)生物學(xué)研究院;河北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 轉(zhuǎn)基因水稻 Xa 抗白葉枯病 T-DNA整合 表達(dá)分析
【基金】：轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(xiàng)(No.2014ZX08001-002) 國(guó)家自然科學(xué)基金(No.31300999) 江漢大學(xué)科研啟動(dòng)項(xiàng)目(No.3003-06000043)資助~~
【分類號(hào)】：S511;Q943.2
【正文快照】： Received:December 24,2015;Accepted:January 28,2016Supported by:National Transgenic Major Program of China(No.2014ZX08001-002),National Natural Science Foundation of China(No.31300999),Internal Grant of Jianhan University(No.3003-06000043).Corresponding a

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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本文編號(hào)：479491