本文關(guān)鍵詞：基于Nc2和Nc5基因的新孢子蟲(chóng)PCR方法的建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本試驗(yàn)篩選了新孢子蟲(chóng)病PCR檢測(cè)的引物,運(yùn)用《新孢子蟲(chóng)病檢疫技術(shù)規(guī)范》(SN/T 3499—2013)對(duì)根據(jù)犬新孢子蟲(chóng)Nc2和Nc5基因設(shè)計(jì)的PCR引物進(jìn)行了評(píng)價(jià)。此外,同時(shí)運(yùn)用F1/R1、F2/R2和SN/T 3499F/SN/T3499R共同對(duì)14份荷斯坦牛和19份西門(mén)塔爾牛全血DNA進(jìn)行PCR檢測(cè),旨在篩選出特異性較好的引物,建立新孢子蟲(chóng)病PCR檢測(cè)方法和了解當(dāng)?shù)夭煌废蹬；夹骆咦酉x(chóng)病的感染率。結(jié)果顯示,3對(duì)引物分別擴(kuò)增出105、128和231bp目的片段,均與預(yù)期目的片段大小相符;其中,F1/R1與SN/T 3499F/SN/T 3499R的最低檢測(cè)量相同,為19.9fg/μL,F2/R2最低檢測(cè)量為199fg/μL,說(shuō)明F1/R1和SN/T 3499F/SN/T 3499R引物的敏感性更好;運(yùn)用F1/R1、F2/R2引物分別對(duì)19.9pg/μL和199fg/μL模板重復(fù)進(jìn)行4次擴(kuò)增,均出現(xiàn)了較明亮的擴(kuò)增條帶,證明兩對(duì)引物重復(fù)性較好。33份血液樣品共檢出6份陽(yáng)性DNA,陽(yáng)性率分別為21.43%和15.79%,檢出復(fù)合率為100%。以上結(jié)果說(shuō)明F1/R1和F2/R2引物均可作為新孢子蟲(chóng)病PCR的診斷引物,本試驗(yàn)初步建立了新孢子蟲(chóng)PCR方法,同時(shí)初步了解了當(dāng)?shù)嘏Ｈ褐行骆咦酉x(chóng)感染情況,為有效預(yù)防和控制新孢子蟲(chóng)病提供了科學(xué)的理論依據(jù)。
【作者單位】： 新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院;伊犁出入境檢驗(yàn)檢疫局綜合技術(shù)服務(wù)中心;巴音郭楞職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物工程系;
【關(guān)鍵詞】： 新孢子蟲(chóng) 新孢子蟲(chóng)病 牛 PCR
【基金】：自治區(qū)科技成果轉(zhuǎn)化專(zhuān)項(xiàng)資金項(xiàng)目(201454129) 庫(kù)爾勒市重點(diǎn)科技計(jì)劃項(xiàng)目(2013051108)
【分類(lèi)號(hào)】：S852.7
【正文快照】： 新孢子蟲(chóng)病(neosporiasis)是由犬新孢子蟲(chóng)(Neosporacaninum)寄生于多種哺乳動(dòng)物有核細(xì)胞內(nèi)的一種原蟲(chóng)病[1],主要引起妊娠母畜流產(chǎn)、死胎或新生兒運(yùn)動(dòng)障礙和神經(jīng)系統(tǒng)疾病[2],妊娠母牛對(duì)該病尤為敏感。其傳播方式包括水平傳播和垂直傳播,宿主動(dòng)物通過(guò)吞食終末宿主(犬)糞便中的孢

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：470841