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斑節(jié)對蝦組織蛋白酶L基因的克隆及其表達分析

發(fā)布時間:2017-06-20 02:01

  本文關(guān)鍵詞:斑節(jié)對蝦組織蛋白酶L基因的克隆及其表達分析,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:通過克隆得到斑節(jié)對蝦(Penaeus monodon)組織蛋白酶L基因(PmCatL)cDNA全長。該基因序列全長1 850bp,包括1 026 bp的開放閱讀框,編碼341個氨基酸。預(yù)測的PmCatL蛋白由信號肽(Met~1-Ala~(18))、前體域(Val~(19)-Gln~(123))和成熟域(Leu~(124)-Val~(341))三部分構(gòu)成,存在3個半胱氨酸蛋白酶活性位點(Cys~(148)、His~(287)、Asn~(308))和1個潛在的糖基化位點(Asn~(99))。具有組織蛋白酶L的E~(45)X_3RX_3FX_2NX_3IX_3N~(64)和G~(187)CXGG~(192)保守序列。同源性分析顯示,PmCatL氨基酸序列與其他物種相似性為36%~75%。進化樹顯示PmCatL和羅氏沼蝦(Macrobrachium rosenbergii)親緣關(guān)系最近,并與其他無脊椎動物的組織蛋白酶L聚成一支。表達結(jié)果表明,PmCatL基因在肝胰腺、淋巴、肌肉、性腺等被測組織中均有表達,其中淋巴和肝胰腺的表達量較高;PmCatL基因在斑節(jié)對蝦仔蝦時期表達量較高,可能與斑節(jié)對蝦在這一時期的生長發(fā)育相關(guān);PmCatL在卵巢發(fā)育的Ⅳ期表達量最高,可能在斑節(jié)對蝦的卵巢發(fā)育中發(fā)揮重要作用。
【作者單位】: 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所農(nóng)業(yè)部南海漁業(yè)資源開發(fā)利用重點實驗室;上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】斑節(jié)對蝦 組織蛋白酶L 基因克隆 序列分析 基因表達 卵巢發(fā)育
【基金】:國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃(863計劃)項目(2012AA10A409) 廣東省科技計劃項目(2013B020201001) 海南省自然科學(xué)基金項目(313116) 廣東省海洋與漁業(yè)科技推廣專項(A201501A06)
【分類號】:S917.4
【正文快照】: 組織蛋白酶類是重要的溶酶體型半胱氨酸蛋白酶,其中組織蛋白酶L(cathepsin L)是半胱氨酸蛋白酶中木瓜蛋白酶C1家族的主要成員,也是一種極其重要的溶酶體型半胱氨酸蛋白內(nèi)肽酶,在生物有機體中廣泛存在[1-2]。組織蛋白酶L以無活性的前體酶原形式合成,經(jīng)過溶酶體或其他蛋白酶水解

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