靛藍(lán)、靛玉紅是菘藍(lán)體內(nèi)的有效藥效成分,屬于吲哚類生物堿.1-脫氧-D-木酮糖還原異構(gòu)酶(DXR),SKikimate激酶(SK)和鄰氨基苯甲酸酯合酶(AS)是吲哚生物堿合成途徑中的三種重要酶,是靛藍(lán)和靛玉紅的合成前體.本文利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)菘藍(lán)葉片和根中BcSK、BcDXR、BcASA1、BcASA2、BcASB的相對(duì)表達(dá)情況進(jìn)行分析,并探究NaHS(硫化氫供體)對(duì)其表達(dá)的影響.NaHS濃度為150 μmol/L,處理時(shí)間分別為3 h、6 h、9 h.結(jié)果表明,在3 h時(shí)處理下NaHS顯著上調(diào)菘藍(lán)的葉片和根中相關(guān)基因的表達(dá),其中只有BcASB的相對(duì)表達(dá)量在葉片中有所下調(diào),6 h和9 h處理下對(duì)藥效基因的表達(dá)呈現(xiàn)出不同程度的抑制和誘導(dǎo).綜上所述,NaHS可能通過(guò)誘導(dǎo)菘藍(lán)幼苗藥效基因的表達(dá)提升靛藍(lán)和靛玉紅的含量,進(jìn)而提升菘藍(lán)的有效藥效成分.

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【部分圖文】：

圖1 NaHS處理對(duì)菘藍(lán)幼苗中BcSK基因表達(dá)情況的影響

SK是莽草酸途徑上第五步的反應(yīng)催化酶,也是莽草酸途徑中第一個(gè)關(guān)鍵酶.BcSK基因在菘藍(lán)幼苗葉片和根部中的表情況如圖1所示.與對(duì)照CK組相比,在150μmol/LNaHS處理下,BcSK基因的相對(duì)表達(dá)量在3h和9h出現(xiàn)明顯上調(diào),在3h時(shí)BcSK相對(duì)表達(dá)量出現(xiàn)峰值,在6h....

圖2 NaHS處理對(duì)菘藍(lán)幼苗中BcDXR基因表達(dá)情況的影響

DXR作為合成吲哚類生物堿萜類部分MEP途徑上第一個(gè)關(guān)節(jié)酶,對(duì)調(diào)節(jié)吲哚類生物堿的合成有著重要的作用.BcDXR基因在菘藍(lán)幼苗葉片和根中的表達(dá)情況如圖2所示.與對(duì)照CK組相比,150μmol/LNaHS處理下,BcDXR基因的相對(duì)表達(dá)量在3h處理情況下葉片中BcDXR基因的相....

圖3 NaHS處理對(duì)菘藍(lán)幼苗中BcASA1基因表達(dá)情況的影響

ASA是編碼鄰氨基苯甲酸合酶亞基的基因,本篇選取關(guān)鍵基因BcASA1和BcASA2來(lái)進(jìn)行相對(duì)熒光定量分析.其中BcASA1基因在菘藍(lán)幼苗葉片和根部中的表達(dá)情況如圖3所示.與CK處理組相比,在150μmol/LNaHS對(duì)BcASA1基因的相對(duì)表達(dá)量在不同處理時(shí)間表現(xiàn)出不同的調(diào)節(jié)....

圖4 NaHS處理對(duì)菘藍(lán)幼苗中BcASA2基因表達(dá)情況的影響

BcASA2基因在菘藍(lán)幼苗葉片和根部中的表達(dá)情況如圖4所示.與CK處理組相比,在150μmol/LNaHS處理下,葉片與根中BcASA2基因的相對(duì)表達(dá)量在3h都出現(xiàn)了明顯上調(diào),而在6h時(shí)表現(xiàn)出明顯下調(diào),在9h處理時(shí)葉片與根分別表現(xiàn)出不同的趨勢(shì).其中,3h時(shí)150μm....

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