煙草是我國(guó)重要經(jīng)濟(jì)作物,植株的生長(zhǎng)發(fā)育直接關(guān)系到煙葉的品質(zhì)。油菜素內(nèi)酯（BRs）是一種重要的、對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育有著多方面調(diào)控作用的激素。油菜素內(nèi)酯受體BRI1是一個(gè)單次跨膜的富含亮氨酸重復(fù)序列的類受體蛋白激酶（leucine-rich repeat receptor-like protein kinase,LRR-RLKs）,該蛋白是BR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的關(guān)鍵組分,目前對(duì)普通煙草中NtBRI1基因的研究較少,對(duì)BRI1的功能機(jī)制尚不明晰。因此,本實(shí)驗(yàn)利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)編輯普通煙草NtBRI1基因,對(duì)T₀突變體的NtBRI1基因進(jìn)行生物信息學(xué)分析,篩選關(guān)鍵結(jié)構(gòu)域改變的突變體測(cè)定其NtBRI1基因表達(dá)量和觀察其表型,以期初步解析普通煙草NtBRI1基因的生物學(xué)效應(yīng),為后續(xù)研究創(chuàng)制新的遺傳材料。研究結(jié)果如下:（1）CRISPR/Cas9定點(diǎn)突變NtBRI1基因利用CRISPR/Cas9技術(shù)編輯NtBRI1基因,獲得26株突變體,突變效率為25.7%（26/101）。靶位點(diǎn)1編輯效率為43.8%（91/208）;靶位點(diǎn)2編輯效率為71.2%（148/208）。...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1CRISPR位點(diǎn)特征（KirGetal.，2015）

圖1.1CRISPR位點(diǎn)特征（KirGetal.，2015）Fig.1.1FeaturesofCRISPRloci（KirGetal.，2015）/Cas的作用機(jī)理[21]分為с個(gè)階段(圖1.2)，第階段是隔區(qū)的獲得，第二階段是CRIPSR基因座的....

圖1.2II型系統(tǒng)CRISPR作用模式圖(方銳.等，2013)

圖1.1CRISPR位點(diǎn)特征（KirGetal.，2015）Fig.1.1FeaturesofCRISPRloci（KirGetal.，2015）CRISPR/Cas的作用機(jī)理[21]分為с個(gè)階段(圖1.2)，第階段是CRISPR變的間隔區(qū)的獲得，....

圖1.3人工改造的CRISPR系統(tǒng)作用示意圖(Hothornetal.,2011)

西南大學(xué)碩士學(xué)位論文為了將CRISPR/Cas技術(shù)更好的應(yīng)用到日常工作中，科學(xué)家對(duì)該系。目前，產(chǎn)膿鏈球菌(StreptococcuspyogenesSF370)的II型系統(tǒng)（最為成功的人工核酸內(nèi)切酶CRISPR/Cas9[22]。通過人為的將RNA進(jìn)行改造，再連....

圖1.1油菜素內(nèi)酯信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)模式圖(衛(wèi)卓赟.等，2011)

在擬南芥中，過量表達(dá)AtHSD1提高了植株鹽脅迫的抗性[77]。BRs對(duì)抗性的調(diào)節(jié)，可能是由于葉片т氣孔密度和氣孔開放程度決定的[78]。研究發(fā)BR可以促進(jìn)н胚軸氣孔的發(fā)育，BR對(duì)氣孔的調(diào)節(jié)受到特定環(huán)境的影響，可多個(gè)水平т對(duì)氣孔的發(fā)育進(jìn)行調(diào)控。BRs介導(dǎo)了植物的高溫和....

本文編號(hào)：4038755