[目的]動脈粥樣硬化(AS)早期階段不容易發(fā)現(xiàn),難以早期診斷,如何及早發(fā)現(xiàn)和預(yù)防AS是一個新興研究熱點。本研究通過采用第二代測序技術(shù),獲得AS與健康人外周血血清的miRNAs差異表達譜,從中找出差異顯著的miRNA分子;研究差異表達的miRNA在AS早期診斷中的作用;并通過生物信息學(xué)方法,分析其調(diào)控的靶基因,闡明血清的miRNAs在AS診斷中的作用。[方法]首先收集20例AS患者和20例健康成年人外周血標本,其中隨機選出3例AS患者及3例健康人外周血提取總RNA,檢測miRNA差異表達水平,采用第二代測序技術(shù)獲得AS患者血清差異miRNA表達譜;選取其中3個miRNA分子通過RT-qPCR方法進行驗證;生物信息學(xué)方法分析驗證后miRNA所調(diào)控的靶基因,采用信號通路分析,揭示其在AS發(fā)生發(fā)展中的作用。[結(jié)果]1.AS患者和健康人在年齡,性別組成方面經(jīng)方差分析,差異無顯著性意義(p>0.05);AS患者的體重指數(shù)高于正常體檢者,說明AS有肥胖的趨勢;AS患者血總膽固醇、低密度脂蛋白(LDL)、甘油三酯水平均高于健康人(p<0.05),而高密度脂蛋白(HDL)水平低于健康人(p&l...

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要英文縮略詞索引
第1章 前言
    1.1 動脈粥樣硬化(AS)早期診斷進展
    1.2 miRNA與 AS
    1.3 第二代測序技術(shù)的應(yīng)用
    1.4 研究內(nèi)容和研究意義
第2章 材料與方法
    2.1 試劑與儀器
    2.2 實驗對象及臨床資料
    2.3 血液樣本的采集與保存
    2.4 總RNA提取
    2.5 第二代測序
    2.6 RT-qPCR檢測
    2.7 生物信息學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)庫及網(wǎng)址
    2.8 統(tǒng)計分析
第3章 結(jié)果
    3.1 AS和健康人一般情況比較
    3.2 總RNA濃度測定
    3.3 AS與健康人差異表達miRNAs譜
    3.4 RT-qPCR驗證二代測序結(jié)果
    3.5 miRNA所調(diào)控的靶基因信號通路分析
第4章 討論
    4.1 AS研究現(xiàn)狀與存在問題
    4.2 AS血清診斷標記物研究進展
    4.3 miRNA可作為AS早期診斷的潛在標志物
    4.4 miR-126-5p與 AS
    4.5 miR-143-3p與 AS
    4.6 miR-221-3p與 AS
    4.7 本研究不足之處
第5章 結(jié)論
參考文獻
文獻綜述 ncRNA在動脈粥樣硬化中的進展
    參考文獻
附錄
攻讀學(xué)位期間的科研成果
致謝



本文編號：4037082