膽道閉鎖(biliary atresia,BA)是引起小兒阻塞性黃疸的常見疾病,預(yù)后差、病死率高,其典型病理特征是以膽管為中心的進(jìn)行性炎癥反應(yīng)。然而,BA的發(fā)病原因至今尚不明確。相關(guān)研究表明某些遺傳因素與BA的發(fā)生密切相關(guān)。我們前期使用GWAS研究表明,BA患兒的STAT3基因表型與正常人群相比存在顯著性差異。那么,STAT3會對BA產(chǎn)生怎樣的影響?其機(jī)制是什么?目的:1.驗(yàn)證BA患兒全基因組關(guān)聯(lián)研究中存在顯著性差異的基因位點(diǎn)并做功能預(yù)測,同時(shí)對BA患兒肝臟STAT3表達(dá)水平進(jìn)行檢測;2.研究STAT3表達(dá)改變對BA的影響及其機(jī)制,為探明膽道閉鎖發(fā)病機(jī)制提供新的思路。方法:本課題分兩個(gè)部分,第一部分:驗(yàn)證STAT3在BA中的遺傳易感性,檢測其在BA患兒肝臟中的表達(dá)1.利用基因質(zhì)譜分析法,對前期發(fā)現(xiàn)的BA異�；蜻M(jìn)行驗(yàn)證并做功能預(yù)測;2.采用熒光定量PCR、Western Blot及免疫組化方法,從mRNA和蛋白水平,對膽總管囊腫及BA患兒肝臟的STAT3表達(dá)進(jìn)行檢測并做比較。第二部分:STAT3表達(dá)下調(diào)對BA的影響及其機(jī)制表述1.使用輪狀病毒(RRV)建立BA小鼠模型,腹腔內(nèi)注射STAT...

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【學(xué)位級別】：博士

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圖1.膽通閉鎖OWAS結(jié)果:324BA班衡與3“正常人，人群中粉在的趁異已通過EIGFNSTRAT矯正

信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活子３?（ＳＴＡＴ３）屬于信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活子（ｓｉｇｎａｌ??ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒｓ?ａｎｄ?ａｃｔｉｖａｔｏｒｓ?ｏｆ?ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ，ＳＴＡＴ）蛋白家族中的重要成員之一，??通過與靶基因ＤＮＡ結(jié)合調(diào)控轉(zhuǎn)錄。隨著ＳＴＡＴ受體磷酸化、聚合和核易位，Ｓ....

圖１．膽道閉鎖已證易感變異均為ｅＱＴＬ，調(diào)控易感基因在ＢＡ中的異常表達(dá)

?第一部分遺傳易感基因ＳＴＡＴ３在ＢＡ中表達(dá)降低???表１．?５００個(gè)ＢＡ患者和１５００個(gè)正常對照驗(yàn)證關(guān)聯(lián)統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果??ＳＮＰ?Ｆｕｎｃ．ｒｅｆｇｅｎｅ?Ｇｅｎｅ．ｒｅｆｇｅｎｅ?Ａ１／Ａ２?Ｆ－Ａ?Ｆ－Ｕ?Ｐ?ＯＲ??ＳＮＰＡ?ｉｎｔｒｏｎｉｃ?ＩＬ－１０?Ｃ／Ｔ?０．２７?０....

圖２．新證ＢＡ易感基因ＳＴＡＴ３、比－１０和丨Ｌ－１８潛在互作網(wǎng)絡(luò)生物信息學(xué)預(yù)測

ＤＡＶＩＤ和ＧＳＥＡ等，發(fā)現(xiàn)這些候選致病基因與已知的疾病致病基因富集在相同??的功能通路上。三個(gè)基因?yàn)楹诵牡幕プ骶W(wǎng)絡(luò)預(yù)測主要基于物理相互作用和共表??達(dá)，ＳＴＡＴ３通過信號通路能夠與１Ｌ－１０、ＩＬ－１８建立基因網(wǎng)絡(luò)協(xié)同（圖２）。??２１??

圖３．?ＳＴＡＴ３基因在膽道閉鎖患兒肝臟組織中表達(dá)顯著性下降

我們利用免疫組化的方法對膽道閉鎖患兒肝臟組織中的ＳＴＡＴ３基因表達(dá)進(jìn)??行了半定量的測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與膽總管囊腫患兒相比，ＳＴＡＴ３基因在膽道閉??鎖患兒肝臟組織中表達(dá)明顯減少（圖３Ａ）。接著，我們又用熒光定量ＰＣＲ的方??法進(jìn)行測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)．？與膽總管囊腫患兒（ｎ＝２０）相比....

本文編號：4021001