發(fā)布時間：2024-06-05 01:22

　　穿心蓮(Andrographis paniculata)是南亞和東南亞地區(qū)重要的傳統藥用植物,具有清熱解毒、涼血、消腫等功效,用于邪毒內盛、感冒發(fā)熱、咽喉腫痛、口舌生瘡、頓咳勞嗽等。目前穿心蓮除作為中藥飲片外,還被制成多種現代劑型應用于臨床。二萜苷類和黃酮苷類化合物為穿心蓮主要有效成分,通常來源于化學合成或從原植物中提取分離,以上兩種方式均難以滿足商業(yè)化需求。與化學方法相比,酶法避免了使用大量有機溶劑對環(huán)境造成的污染,并減少副產物的生成,彌補了復雜結構化合物在合成過程中較難建立化學合成途徑的缺陷。糖基化廣泛存在于植物中,是一種重要的后修飾反應。糖基化可將糖苷配基轉化為性質更穩(wěn)定、結構和生物活性多樣的糖苷。糖基轉移酶是一類參與眾多活性糖苷類化合物生物合成的關鍵酶,植物中存在大量的糖基轉移酶執(zhí)行不同的糖基化功能。對糖基轉移酶這一多基因家族進行基因克隆和功能驗證將具有重要意義,為酶法合成天然小分子化合物糖苷、開發(fā)糖基化工具酶以及新藥研發(fā)提供了新的物質基礎和基因資源。目前,國內外尚未見穿心蓮糖基轉移酶的研究報道。本研究在穿心蓮(A.paniculata)中挖掘得到1條具有顯著底物寬泛性及高催化...

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1-1新穿心蓮內酯的推測生物合成途徑

5糖基化是天然產物生物合成過程中的最后一步，也是極其關鍵的修飾步驟[27-28]，但穿心蓮中二萜苷及黃酮苷類化合物生物合成途徑最后一步的關鍵糖基轉移酶基因尚不明確。圖1-1新穿心蓮內酯的推測生物合成途徑一步催化反應用實線頭表示，多步催化反應用虛線箭頭表示。MVA（Mevalona....

圖1-2穿心蓮中二萜及其糖苷類化合物的推測生物合成途徑2植物糖基轉移酶的研究現狀

6PoUGT圖1-2穿心蓮中二萜及其糖苷類化合物的推測生物合成途徑2植物糖基轉移酶的研究現狀2.1糖基轉移酶(GTs)的特征糖基轉移酶（GTs）（EC2.4.x.y）催化糖基部分從活化的供體分子轉移到特定的受體分子上。截至2019年3月，碳水化合物活性酶數據庫（CAZy）中記錄了....

圖2-1基于新穿心蓮內酯積累和轉錄組分析的ApUGTs篩選（a）不同時間點由茉莉酸甲酯誘導的穿心蓮葉片中NAG（新穿心蓮內酯）的積累量

283實驗結果3.1穿心蓮轉錄組中的候選糖基轉移酶基因本研究中，我們發(fā)現茉莉酸甲酯誘導穿心蓮植物葉片可積累新穿心蓮內酯。在茉莉酸甲酯誘導第48h，新穿心蓮內酯的積累量達到最高。為了鑒定可催化產生新穿心蓮內酯的糖基轉移酶，通過比較轉錄組學分析，總共篩選得到9個糖基轉移酶，其在茉莉酸....

圖2-2候選ApUGT1基因蛋白序列比對結果

30ApUGT8與枸杞（Lyciumbarbarum）中糖基轉移酶（BAG80541）顯示同源性為52%；此外，克萊門柚（Citrusclementina）和桑（Morusnotabilis）中的糖基轉移酶（Genbank號分別為XP_006447932和XP_010095580....

本文編號：3989445