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吊蘭硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白編碼基因的克隆及功能分析

發(fā)布時(shí)間:2024-05-29 01:19
  硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(nitrate transporter,NRT)在植物從土壤里吸收利用硝酸鹽的過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用。已有報(bào)道表明,硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的過(guò)量表達(dá)可顯著提高作物的氮素利用效率和產(chǎn)量。因此,從特殊生物資源中克隆硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因,對(duì)利用生物工程等技術(shù)大幅度提高作物的氮素利用效率,提高農(nóng)作物產(chǎn)量,增強(qiáng)植物營(yíng)養(yǎng)抗病性,減少因氮素過(guò)量施用而造成的環(huán)境污染都具有極其重要的意義。由于氮素的吸收利用與植物的生長(zhǎng)速率直接相關(guān),本研究首先對(duì)小水榕(Anubias nana)、狐尾藻(Myriophyllum verticillatum)、吊蘭(Chlorophytum comosum)等21種速生植物的生長(zhǎng)速率進(jìn)行了篩選,發(fā)現(xiàn)吊蘭、狐尾草、日本宮廷草和圓葉元寶草的生長(zhǎng)速度相對(duì)較快,濕重增加較多,0.5g植物健壯莖枝生長(zhǎng)4周后濕重分別增長(zhǎng)56%、52%、72%和84%。尤其需要指出的是,吊蘭具有根系發(fā)達(dá),且生長(zhǎng)快速,生長(zhǎng)能力極強(qiáng),可長(zhǎng)期水培存活的特點(diǎn)。水培吊蘭與供試的其他植物相比,根系柔軟潔白、晶瑩剔透,長(zhǎng)勢(shì)比土培更旺盛。為此,以吊蘭根系為材料,利用簡(jiǎn)并引物擴(kuò)增技術(shù)和RACE技術(shù),成功從吊...

【文章頁(yè)數(shù)】:98 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1-1擬南芥硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白AtNRT1.1(Tsayetal,2007)

圖1-1擬南芥硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白AtNRT1.1(Tsayetal,2007)

T-DNA突變體發(fā)現(xiàn)CHL1。最初它被認(rèn)為成編碼低親和硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的基因,但研究表明它是一個(gè)通過(guò)蘇氨酸磷酸化開(kāi)關(guān)來(lái)實(shí)現(xiàn)高低親和轉(zhuǎn)變的雙親和性的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(Liuetal,1999;Tsayetal,1993)(圖1-1)。高等植物中NRT1家族非常龐大,該家族基因數(shù)量很多....


圖2-1簡(jiǎn)并引物的設(shè)計(jì)

圖2-1簡(jiǎn)并引物的設(shè)計(jì)

第二章硝酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白編碼基因的克隆EF6:GCNTTYCAYYTNAGYTGG,DER6:CCANARYCTNCCYCTCATNCEF7:GGNTGGGGNAAYATGGGN,DER7:CATRCTNCCCCACATNGGEF8:YGTNTGYTGYCARTTYTGG,D....


圖2-2吊蘭根部RNA電泳圖

圖2-2吊蘭根部RNA電泳圖

0.540.510.560.480.530.590.520.550.620.720.680.740.540.570.590.560.530.530.520.570.630.550.450.57及反轉(zhuǎn)錄cDNA用植物總RNA提取....


圖2-3Touch-downPCR擴(kuò)增Fig.2-3Touch-downPCRamplification

圖2-3Touch-downPCR擴(kuò)增Fig.2-3Touch-downPCRamplification

圖2-3Touch-downPCR擴(kuò)增g.2-3Touch-downPCRamplificaker;Lane1:CcNPF8.3.1編碼基因擴(kuò)rker;Lane1:ThePCRfragmentofCc



本文編號(hào):3983876

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