地中海貧血(簡稱“地貧”)是由珠蛋白基因缺失或突變引起的遺傳性溶血性貧血,是全球分布最廣、累積人群最多的一種單基因遺傳病。地貧目前尚無有效的治療措施,并且治療費(fèi)用較高,因此,地貧人口的出生尤其是中間型和重型地貧患兒的出生給家庭和社會醫(yī)療衛(wèi)生事業(yè)帶來沉重的負(fù)擔(dān)。地貧雖難治,但可防,做好婚前和孕前人群的地貧基因篩查,若夫妻雙方篩查結(jié)果為地貧陽性者,再進(jìn)行產(chǎn)前診斷,此措施可以有效的預(yù)防地貧患者的出生。隨著PCR(聚合酶鏈反應(yīng))技術(shù)的不斷完善,基因檢測技術(shù)已成為地貧診斷的金標(biāo)準(zhǔn),逐漸代替?zhèn)鹘y(tǒng)的血液常規(guī)檢查和血紅蛋白電泳技術(shù),臨床上常見的地貧基因檢測技術(shù)包括Gap-PCR(跨越斷裂點(diǎn)PCR)、PCR-RDB(反向點(diǎn)雜交)、PCR-流式熒光雜交法、基因芯片、MLPA(多重連接探針擴(kuò)增技術(shù))等,這些檢測技術(shù)存在檢測型別局限、成本高或無法同時(shí)檢測缺失型和突變型的缺點(diǎn)。因此開發(fā)一種高通量、低成本并可同時(shí)檢測缺失型和突變型的新技術(shù)迫在眉睫。本研究根據(jù)α-地貧和β-地貧相關(guān)的HBA1、HBA2和HBB三個基因的特點(diǎn)設(shè)計(jì)一系列引物,同時(shí)引入用于識別樣本的標(biāo)簽序列。利用多重PCR技術(shù)將樣本中的HBA1、HBA2...

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-1.primerindex和adaptorindex標(biāo)記后的PCR產(chǎn)物示意圖

華南理工大學(xué)碩士學(xué)位論文16PCR產(chǎn)物進(jìn)行sanger測序，測序結(jié)果與參考基因序列做比對，序列一致并且測序峰圖質(zhì)量較好的引物作為最終確定的引物對。2.2.3.2缺失型引物設(shè)計(jì)基于跨越斷裂點(diǎn)PCR（Gap-PCR）的原理，針對常見的α地貧缺失型–α3.7、–α4.2、--SEA、-....

圖3-1DNA濃度分布情況

華南理工大學(xué)碩士學(xué)位論文32例已知地貧型別結(jié)果的樣本進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)包括DNA提取和PCR擴(kuò)增。（1）DNA提取結(jié)果本研究采用Magen的MagPureBlood&TissueDNAKFKit試劑盒對742份樣本進(jìn)行提取DNA，采用ND-8000分光光度計(jì)測定提取后DNA的....

本文編號：3974051