牦牛作為青海、西藏高原特殊物種,具有十分重要的經(jīng)濟和科研價值,但其生產(chǎn)性能和生殖繁育率低下,極大地影響了牦牛的繁殖性能。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)CRY1基因(Cryptochrome 1,隱花色素1)與類固醇激素分泌密切聯(lián)系。CRY1是一類對藍光和近紫外光敏感的黃素類蛋白,廣泛存在于高等真核生物中,是哺乳動物生物鐘基因之一,既是光受體又是生物鐘的組成部分,經(jīng)體液和神經(jīng)途徑送達效應(yīng)器,調(diào)節(jié)其生理、生化和行為。本研究以牦牛CRY1基因為對象,通過RT-PCR技術(shù)克隆牦牛CRY1基因并進行序列分析;通過實時熒光定量PCR、免疫組織化學法和免疫蛋白印跡法檢測CRY1基因在牦牛不同組織器官中的表達規(guī)律;以牦牛睪丸支持細胞為研究對象,通過轉(zhuǎn)染siRNA的方法進行CRY1基因功能驗證。結(jié)果發(fā)現(xiàn):1.牦牛CRY1基因CDS全長為1712 bp,ORF為1257 bp,共編碼418個氨基酸殘基,無跨膜結(jié)構(gòu)區(qū),編碼的蛋白屬可溶性蛋白。2.牦牛CRY1基因在各組織器官中(卵巢,睪丸,心臟,肝臟,脾臟,肺臟,腎臟和肌肉)均有表達,且在肌肉組織中的表達量顯著高于其它組織(P<0.05)。3.牦牛CRY1基因mR...

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【學位級別】：碩士

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圖1牦牛CRY1基因PCR擴增產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳圖

圖1牦牛CRY1基因PCR擴增產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳圖garosegelelectrophoresisofRT-PCRampliconsofyakCRM.DNA相對分子質(zhì)量標準DL2000；1-2.PCR產(chǎn)物。M.DL2000DNAmarke....

圖2牦牛CRY1的二級結(jié)構(gòu)預(yù)測

11圖2牦牛CRY1的二級結(jié)構(gòu)預(yù)測Figure2SecondarystructurepredictionofyakCRY1

圖3牦牛CRY1的三級結(jié)構(gòu)預(yù)測

圖3牦牛CRY1的三級結(jié)構(gòu)預(yù)測Figure3PutativetertiarystructureofyakCRY1CRY1同源性及系統(tǒng)發(fā)育分析last發(fā)現(xiàn)，牦牛CRY1基因核苷酸序列與其他物種的相似

圖4不同物種間基于CRY1氨基酸序列構(gòu)建的進化樹

圖4不同物種間基于CRY1氨基酸序列構(gòu)建的進化樹Figure4PhylogenetictreeconstructedbydifferentspeciesbasedonCRY1aminoacidsequence.3討論CRY1作為重要的時鐘基因，....

本文編號：3951281