棉花是主要的纖維作物,也是重要的油料作物。在不占據(jù)額外的耕地面積和不降低纖維品質(zhì)的前提下,通過基因工程技術(shù)提高種子含油量、降低棉酚含量,從而改善棉籽油品質(zhì)增加我國植物油的供應(yīng)。二酰甘油�；D(zhuǎn)移酶(DGAT)是三酰甘油合成最后一步反應(yīng)酶,它的表達(dá)水平與油脂含量密切相關(guān),前人的多項(xiàng)研究證明異源表達(dá)DGAT能顯著的提高植物種子的含油量。本研究克隆了芝麻、蓖麻、油葵和花生4種油料作物的DGAT1基因,利用釀酒酵母表達(dá)體系驗(yàn)證功能后,轉(zhuǎn)化至棉花以創(chuàng)造高油種質(zhì)。另外,通過CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)敲除棉花色素腺體形成基因GoPGF,創(chuàng)造無腺體的新種質(zhì),為解析腺體形成調(diào)控機(jī)理以及腺體與棉酚的關(guān)系提供了重要的研究材料。主要結(jié)果如下:(1)生物信息學(xué)分析表明克隆4種油料作物SiDGAT1、RcDGAT1、HaDGAT1、AhDGAT1基因均具有DGAT1特征,且酵母表達(dá)體系表明四種作物來源的DGAT1均有DGAT酶活性;(2)在棉花中過表達(dá)SiDGAT1、RcDGAT1、HaDGAT1、AhDGAT1,根據(jù)Southern雜交結(jié)果,分別篩選到4、8、11、10個單拷貝轉(zhuǎn)化事件,并且在棉花中均可正...

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2.1不同油料作物DGAT1基因克隆M:5Kmaker；SiDGAT1片段長度為1632bp；AhDGAT1片段長度為1581bp；HaDGAT1片段長度為1524bp；

圖2.1不同油料作物DGAT1基因克隆AT1片段長度為1632bp；AhDGAT1片段長度為1581bp；HaDGRcDGAT1片段長度為1566bp。Fig.2.1CloningresultsofDGAT1geneGAT1fragmentle....

圖2.2DGAT1基因保守結(jié)構(gòu)域序列比對ⅠⅤ分別為：精氨酸簇、酰基CoA信號結(jié)合區(qū)、脂肪酸蛋白信號區(qū)、DAG結(jié)合區(qū)、C末端內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜基序Fig.2.2AlignmentofconserveddomainsequencesoftheDGAT1geneIV:argininecluster、acylCoAsignalbindingregion、fattyacidproteinsignalregion、DAGbindingregion、

圖2.2DGAT1基因保守結(jié)構(gòu)域序列比對Ⅰ~Ⅴ分別為：精氨酸簇、�；鵆oA信號結(jié)合區(qū)、脂肪酸蛋白信號區(qū)、DAG結(jié)合區(qū)、C末端內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜基序Fig.2.2AlignmentofconserveddomainsequencesoftheDGAT1gene....

圖2.3植物DGAT1基因同源性分析及motifFig.2.3HomologyandmotifanalysisofDGAT1sequenceinplants

Ah-DGAT1471T/C618T/C1077A/G1445G/A2.3.2.2DGAT1系統(tǒng)進(jìn)化樹分析通過MEGA7構(gòu)建進(jìn)化樹分析，進(jìn)一步了解植物中不同的DGAT1親緣關(guān)從圖中可以看出不同科屬之間的遺傳距離，相同科屬親緣關(guān)系距離較近，十字的擬南芥AtDG....

圖2.4DGAT1跨膜結(jié)構(gòu)域的預(yù)測

華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2018屆碩士研究生學(xué)位論文2.3.2.3DGAT1跨膜結(jié)構(gòu)域預(yù)測運(yùn)用TMHMM網(wǎng)站預(yù)測SiDGAT1、AhDGAT1、HaDGAT1、RcDGAT1的跨膜結(jié)構(gòu)域。如圖2.4所示，克隆的四個DGAT1基因均具有9個跨膜結(jié)構(gòu)域，且N端在....

本文編號：3938839