【目的】SiGolS6是芝麻肌醇半乳糖苷合成酶家族成員,在植物抗旱過程中可能發(fā)揮重要作用。研究SiGolS6在植物干旱脅迫抗性中的功能,以期為芝麻抗旱遺傳改良提供理論基礎(chǔ)和基因資源�！痉椒ā坷梅崔D(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)方法從芝麻中克隆獲得肌醇半乳糖苷合成酶基因SiGolS6。使用InterProScan、ClustalX2和MEGA5.2等生物信息學(xué)軟件對序列進行分析。通過對轉(zhuǎn)SiGolS6擬南芥材料的表型分析和生理指標(biāo)測定,研究SiGolS6在植物抗旱性中的功能及作用機理。【結(jié)果】克隆獲得SiGolS6的全長CDS序列為921 bp,編碼306個氨基酸,其蛋白質(zhì)分子量為35.07 kD,等電點為4.75。序列分析顯示SiGolS6蛋白含有糖基轉(zhuǎn)移酶保守結(jié)構(gòu)域(IPR002495),屬于糖基轉(zhuǎn)移酶超家族。與其他物種GolS蛋白構(gòu)建的系統(tǒng)進化樹中,SiGolS6與馬鈴薯中的同源基因相似度較高。利用潮霉素篩選和PCR鑒定,獲得6個獨立的轉(zhuǎn)基因擬南芥株系;qRT-PCR分析篩選出表達量較高的3個轉(zhuǎn)基因株系(OE-2、OE-3和OE-4)...

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圖3轉(zhuǎn)基因株系中棉子糖含量檢測

圖2轉(zhuǎn)基因擬南芥的獲得和鑒定3討論

圖2轉(zhuǎn)基因擬南芥的獲得和鑒定

圖1SiGolS6和其他物種GolS的多序列比對（A）和系統(tǒng)進化分析（B)圖3轉(zhuǎn)基因株系中棉子糖含量檢測

圖4轉(zhuǎn)基因擬南芥耐旱性鑒定

植物在正常條件下RFOs含量很少，但在逆境脅迫下，RFOs的積累會被誘導(dǎo)，從而增強植株的抗逆性[7-8,32]。GolS是催化RFOs合成的關(guān)鍵酶[3]，其活性會影響RFOs的積累水平[33]。檢測轉(zhuǎn)基因和野生型植株的棉子糖含量發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)基因擬南芥的棉子糖含量顯著高于野生型植株，說....

圖4轉(zhuǎn)基因擬南芥耐旱性鑒定

圖4轉(zhuǎn)基因擬南芥耐旱性鑒定圖5轉(zhuǎn)基因擬南芥氧化相關(guān)生理指標(biāo)測定

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