發(fā)布時(shí)間：2024-03-11 06:07

　　在真核生物中,蛋白質(zhì)的N末端乙酰化修飾是一種非常普遍的蛋白修飾類型。蛋白質(zhì)組學(xué)的研究結(jié)果結(jié)合生物信息學(xué)的預(yù)測(cè)表明,在低等真核生物釀酒酵母中50%-70%的蛋白發(fā)生Nt乙酰化修飾,模式植物擬南芥中70%-75%的蛋白發(fā)生Nt乙�；揎�,體外培養(yǎng)的人細(xì)胞中70%-90%的蛋白發(fā)生Nt乙�；揎�。蛋白質(zhì)的Nt乙�；揎検怯梢幌盗羞M(jìn)化保守的N末端乙酰轉(zhuǎn)移酶復(fù)合體(N-terminal acetyltransferases complex,Nats)催化完成的,Nats以乙酰輔酶A作為乙酰基團(tuán)的供體,催化蛋白質(zhì)第一個(gè)氨基酸殘基的α氨基產(chǎn)生乙�；揎�,這種修飾不但使蛋白質(zhì)的分子量增加了42 Da,同時(shí)屏蔽了蛋白質(zhì)N末端氨基所帶的正電荷。蛋白質(zhì)Nt乙�；揎椫饕枪卜g修飾的過程,大部分Nats與核糖體錨定在一起,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)剛剛被翻譯出20-50個(gè)氨基酸的新生多肽時(shí),Nats催化完成Nt乙酰化修飾。與蛋白質(zhì)賴氨酸的乙酰化修飾不同,Nt乙�；遣豢赡娴男揎椷^程。乙酰輔酶A是生物體內(nèi)重要的代謝物,Nats通過催化蛋白Nt乙�；揎棇Ⅲw內(nèi)代謝狀態(tài)與蛋白功能調(diào)控聯(lián)系起來,增加了生命活動(dòng)調(diào)控的精度和廣度。在真核...

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1真核生物中N末端乙酰轉(zhuǎn)移酶類型[132]

山西師范大學(xué)碩士學(xué)位論文6Nats有更多的底物類型，真核生物后來通過基因復(fù)制，進(jìn)化出特異的N末端乙酰轉(zhuǎn)移酶，而輔助亞基可能會(huì)影響蛋白底物的特異性，并且負(fù)責(zé)將Nats錨定到核糖體上。圖1-1真核生物中N末端乙酰轉(zhuǎn)移酶類型[132]NatA-NatE對(duì)底物蛋白進(jìn)行共翻譯修飾，而Nat....

圖3-2SRR基因結(jié)構(gòu)和T-DNA插入位點(diǎn)示意圖

結(jié)果與分析253結(jié)果與分析3.1SRR基因突變體的鑒定為了探究擬南芥中N末端乙酰轉(zhuǎn)移酶的功能，我們從ABRC擬南芥突變體庫中購買到多個(gè)N末端乙酰轉(zhuǎn)移酶基因的突變體，并對(duì)突變體進(jìn)行了DNA水平的鑒定和初步的表型觀察，我們發(fā)現(xiàn)其中一個(gè)純合突變體表現(xiàn)為主根變短的表型，我們將其命名為SR....

圖3-3srr-1突變體DNA水平的鑒定

結(jié)果與分析253結(jié)果與分析3.1SRR基因突變體的鑒定為了探究擬南芥中N末端乙酰轉(zhuǎn)移酶的功能，我們從ABRC擬南芥突變體庫中購買到多個(gè)N末端乙酰轉(zhuǎn)移酶基因的突變體，并對(duì)突變體進(jìn)行了DNA水平的鑒定和初步的表型觀察，我們發(fā)現(xiàn)其中一個(gè)純合突變體表現(xiàn)為主根變短的表型，我們將其命名為SR....

圖3-4RT-PCR鑒定srr-1突變體中SRR基因的轉(zhuǎn)錄本水平

山西師范大學(xué)碩士學(xué)位論文26我們對(duì)srr-1突變體進(jìn)行了RNA水平的鑒定，以檢測(cè)突變體中SRR基因的轉(zhuǎn)錄本情況。通過提取野生型和srr-1突變體生長(zhǎng)7d的幼苗的RNA，對(duì)RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，合成cDNA，然后以cDNA為模板，以FP+RP引物對(duì)進(jìn)行擴(kuò)增。我們觀察到在野生型的cDNA....

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