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矮牽牛PhRAX2與PhRAX3基因的克隆及表達(dá)分析

發(fā)布時(shí)間:2024-02-14 18:53
  矮牽牛(Petunia hybrida.),茄科碧冬茄屬,花色豐富、花期長(zhǎng),在園林中的應(yīng)用極為廣泛。同時(shí),矮牽牛轉(zhuǎn)基因較為容易,生長(zhǎng)周期短,目前已成為分枝發(fā)育及抗逆研究的模式植物。矮牽牛栽培過(guò)程中需要多次打頂來(lái)控制株型,大大提高了生產(chǎn)成本。因此,培育多分枝的新品種是解決矮牽牛高效生產(chǎn)的關(guān)鍵。此外,干旱等逆境脅迫是限制矮牽牛應(yīng)用范圍的主要因素。因此,培育抗逆性強(qiáng)的新品種是矮牽牛研究的重要方向。為初步探究矮牽牛PhRAX2和PhRAX3的功能,克隆了 PhRAX2、PhRAX3的全長(zhǎng)序列以及PhRAX3的啟動(dòng)子序列,對(duì)其生物信息學(xué)進(jìn)行了分析,并對(duì)PhRAX2及PhR4X3在不同組織,不同處理下的表達(dá)特性進(jìn)行了研究。構(gòu)建了PhRAX2、PhRAX3過(guò)表達(dá)載體,以及pPhRAX3融合GUS載體,并轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌。具體結(jié)果如下:1、克隆了R2R3-MYB家族基因PhR4X2,該基因全長(zhǎng)864 bp,與煙草NtRAX2的相似性高達(dá)70%;克隆1R-MYB家族基因PhRAX3,該基因全長(zhǎng)1539 bp,與番茄S1RAX3、辣椒CaRAX3等物種的前80個(gè)氨基酸序列相似度極高;克隆PhRAX3的啟動(dòng)子序列...

【文章頁(yè)數(shù)】:56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖3-1熒光定量PCR引物檢測(cè)??Fig.?3-1?The?detection?of?fluorescent?primers??

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圖4-1?M/MV2的擴(kuò)增結(jié)果(864?bp)??Fi.?4-1?Amlification?results?of?PhRAX2(864?bp)??

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物信息學(xué)分析??根據(jù)己經(jīng)公布的矮牽牛基因組序列設(shè)計(jì)引物RAX2-F/RAX2-R,通過(guò)PCR擴(kuò)增,??并對(duì)目的條帶進(jìn)行膠回收,測(cè)序后獲得長(zhǎng)度為864?bp的cDNA片段。通過(guò)NCB1??數(shù)據(jù)庫(kù)應(yīng)用blast對(duì)比,結(jié)果顯示該片段與矮牽;蚪M公布序列一致且與煙草??的?(XM_01....


圖4-2?基因的全長(zhǎng)cDNA及氨基?

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圖4-3?PhRAX2的二級(jí)結(jié)構(gòu)圖??Fig.?4-3?Predicted?secondary?structure?of?PliRAX2??

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本文編號(hào):3898441

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